香蕉叶片低温胁迫下差异表达cDNA消减文库的构建.pdfVIP

1 2 热 带 生 物 学 报 Vol． 1 No． 2 第 卷第 期 20 10 6 JOURNAL OF TROPICAL ORGANISMS Jun. 20 10 年 月 文章编号:1674 － 7054 (2010)02 － 0110 － 04 香蕉叶片低温胁迫下差异表达cDNA 消减文库的构建 1 2 2 2 2 1 ，2 ， ， ， ， ， 祁君凤 冯仁军 程 萍 袁克华 张丽丽 张银东 (1． ， 570228 ;2 ． 海南大学农学院 海南海口 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 ， 57 1101) 农业部热带作物生物技术重点开放实验室 海南海口 : ， (suppression subtractivehybridization ，SSH) 摘 要 为了解析香蕉寒害的分子机理 应用抑制性消减杂交技术 cDNA ， 、 ， 成功构建了香蕉叶片在低温胁迫下与未处理的差异表达的 消减文库 并通过经蓝 白斑筛选 克隆测 ， PCR No． 28 ， 序及序列分析 以及应用半定量 技术对随机选取的 基因片段进行表达分析等方法 初步分析了 cDNA 。 ， cDNA cDNA 实验所构建的 消减文库 结果表明 实验所构建的 消减文库为低温胁迫特异表达的 消减 ; ; No． 28 文库 测序及序列分析的结果暗示可能有相当多的未知功能基因参与了香蕉抗寒的过程 随机选取的 ， cDNA ， 的表达分析检测结果证实 通过对构建的 消减文库的全面分析 有可能获得一批低温胁迫诱导特异表 ， ， 、 达的新基因 尤其对其功能的深入了解 将为全面解析香蕉寒害的分子机理 寒害过程中的信号转导打下理 论基础。 : ; ;SSH 关键词 香蕉叶片 低温胁迫 差减文库 中图分类号:Q 786 文献标志码:A ［1 － 3］ ， 、 。 近年来 科技工作者从生理 生化等角度对香蕉寒害的机理进行了大量的研究 适当的低温诱导 ， 。 ， 可启动香蕉抗寒基因的表