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664 生 物 工 程 学 报 常亚南 等/人工软骨支架中TGF-β1 缓释壳聚糖微球对ATDC-5 细胞生长的促进作用 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn April 25, 2017, 33(4): 664−671 DOI: 10.13345/j.cjb.160360 ©2017 Chin J Biotech, All rights reserved ·组织工程与细胞培养· TGF-β1 ATDC-5 1 2 1 1 1 常亚南 ，刘浩 ，冯成宝 ，何晓亮 ，周晓辉 1 050000 2 050000 , , , . TGF-β1 ATDC-5 . , 2017, 33(4): 664–671. Chang YN, Liu H, Feng CB, et al. ATDC-5 growth promoted by sustained-releasing chitosan microspheres loading TGF-β1 in artificial cartilage scaffolds. Chin J Biotech, 2017, 33(4): 664–671. 摘 要 : 为了提高本课题组前期构建的Ⅱ型胶原蛋白-透明质酸-硫酸软骨素的人工三维软骨支架对软骨细胞 生长的促进作用，采用乳化交联法以壳聚糖为原料，加入细胞转化生长因子 TGF-β1，并通过真空冷冻干燥技 术制备了包裹TGF-β1 的壳聚糖微球。然后分别将其与空白壳聚糖微球整合进软骨支架中，并接种小鼠软骨细 胞ATDC-5 ，通过观察细胞生长状态来评价缓释微球在人工软骨支架中对软骨细胞生长是否具有促进作用。结 果显示所制得的壳聚糖微球球体表面光滑，分散均匀，直径在 100 nm 左右，吸水率良好可达983.73%±4.38% ， 抗酶解作用较强，第28 天时降解率仅达到51.0%±1.8%。由TGF-β1 累积释放曲线可知TGF-β1 在开始的24 h 内释放最快，之后逐渐减慢，在120 h 之后进入平台期，具有缓释效果。MTT 试验以及荧光染色试验充分表 明，由Ⅱ型胶原蛋白、透明质酸以及硫酸软骨素构建的三维软骨支架适合ATDC-5 细胞的生长增殖，并且壳聚 糖微球对TGF-β1 的缓释能够显著促进细胞的生长。 : 组织工程，软骨支架，壳聚糖微球，转化生长因子，小鼠软骨细胞 Received: September 26, 2016; Accepted: January 17, 2017 Supported by: 100 Talent Program of Hebei Province (No. E2012100005), Scientific Research Staring Foundation for the Returned Overseas Chinese Scholars, Ministry of Education of China, Natural Science Foundation of Hebei Province (No. C2012208019). Corresponding author: Xiaohui Zhou. Tel/Fax: +86-31 1 E-mail: zhouxh2003@ (No. E2012100005) (No. C2012208019) 常亚南 等/人工软骨支架中TGF-β1 缓释壳聚