DNA的复制、转录和翻译.ppt.ppt

1、DNA的复制 以亲代DNA分子为模板合成一个新的与亲代模板结构相同的子代DNA分子的过程。 A、半保留复制（Semiconservative Replication） 以亲代DNA每一条链作模板，合成复制两条完全相同的子代双链DNA。子代DNA中均含有一条亲代DNA链。 1.1、DNA复制的特点 B、从复制起始点开始 基因序列复制时，在特定位点开始（具有特定核苷酸序列片段），即复制起始点（复制子replicator）。在原核生物中，复制起始点通常为一个，而在真核生物中则为多个。 C、半不连续，双向复制 以复制起始点为中心，双向复制；低等生物中，可进行单向复制，如滚环复制。 DNA聚合酶以5‘→3’方向复制（模板DNA链方向为3‘→5’）。 * 原核生物中的三种DNA聚合酶（DDDP）? 注：参与DNA复制的主要是pol II和pol I， pol II一般在pol II和pol I缺乏的情况下发挥作用。DNApol I:Ⅱ:III = 400:40:20，但是pol III的比活性超过pol I的10倍。 DNA DNA DNA * 单肽链的大分子蛋白质，可被特异的蛋白酶水解为两个片段，其中的大片段称为Klenow fragment，具有5→3聚合酶活性和3→5外切酶的活性。 DNA Polymerase I（Kornberg酶） DNA Polymerase III 十种亚基组成，其中α亚基具有5→3聚合DNA的酶活性，具有复制DNA的功能；而ε亚基具有3→5外切酶的活性，与DNA复制的校正功能有关。 * 引物酶（Primase） 催化引物合成的酶，属于RNA聚合酶又不同于转录酶，在DNA链复制过程中与解旋酶共同作用。 引发体(Primosome ) 由解旋酶、引物酶等多种蛋白质组成的蛋白质复合体，结合并能在链模板上移动，可生成RNA短片段引物，引导DNA聚合酶合成冈崎片段。 * E、引物引导 基因复制过程需一段RNA分子作为引物。 RNA引物分子特点： 具有3’-OH （自由羟基）； 由引物酶基于单链DNA为模版合成（由引发体合成）； 原核生物中约为10~16个核苷酸，真核生物中约为10个核苷酸； 与模板DNA碱基配对； 能被DNA聚合酶Ⅰ切除（DNA复制开始处的几个核苷酸易出现差错…..提高复制准确性） 注：腺病毒DNA和枯草菌噬菌体φ29DNA的复制不需要RNA引物，只利用先导链，且从其一端开始进行复制。 * F、忠实复制 遵守严格的碱基配对规律； DNA聚合酶在复制时对碱基的正确选择； 对复制过程中出现的错误及时进行校正。 * 1.2、DNA复制过程 复制起始 1）预引发 由拓扑异构酶和解链酶作用，使DNA的超螺旋及双螺旋结构解开，碱基间氢键断裂，形成两条单链DNA。单链DNA结合蛋白（SSB）结合在两条单链DNA上，形成复制叉。 引发体组装： 解旋解链，形成复制叉 蛋白因子（如dnaB等）识别复制起始点，并与其他蛋白因子以及引物酶一起组装形成引发体。 2）引发 在引物酶的催化下，以DNA为模板，合成一段短RNA片段（3-OH） * 复制延长 1）DNA子链的生成 在DNA聚合酶的催化下，分别5‘→3’ 和3‘→5’亲代DNA链为模板，合成子代DNA链。 原核生物：DNA聚合酶Ⅲ 真核生物： DNA聚合酶α(延长随从链)和δ（延长领头链） 2）引发体移动 引发体向前移动，解开新的局部双螺旋，形成新的复制叉，随从链重新合成RNA引物，继续进行链的延长。 * 复制终止 1）去除引物，填补缺口 RNA引物水解，聚合酶延长引物缺口处的DNA，直到剩下最后一个磷酸酯键的缺口。 原核生物：DNA聚合酶Ⅰ水解RNA引物，同时填补缺口 真核生物：特殊核酸酶水解RNA引物。DNA聚合酶αδ填补缺口 2）连接冈崎片段 在DNA连接酶的催化下，形成最后一个磷酸酯键，将冈崎片段连接起来，形成完整的DNA长链 * 区别 原核生物 真核生物 DNA合成的时期 整个细胞生长过程 细胞周期的S期 复制起点数 单个 多个 RNA引物长度 10~16核苷酸 10个核苷酸 冈崎片段长度 1000~2000核苷酸 100~150核苷酸 前导链与后随链的合成 聚合酶Ⅲ同时控制 聚合酶δ控制前导链 聚合酶α控制后随链 原核生物和真核生物DNA复制区别 * 2、DNA的转录 RNA分子 tRNA： 转运RNA mRNA：信使RNA rRNA： 核糖体RNA sRNA： 小分子RNA * 复制 转录 模板 两股全长DNA链 模板链: DNA单链的部分(不对称转录) 原料 dNTP NTP 酶 DNA聚合酶(DDDP) RNA聚合酶(DDRP) 产物 子代DNA RNA（mRNA, tRNA, rRNA ） 配对 A-T；G-C A-