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实验常用仪器学 基础医学与医学技术学院 钱 晖 2013 仪器重要性/课程重要性 实验操作离不开仪器； 样品制备与仪器、实验结果密切相关； 仪器的错误操作影响实验结果； 正确的分析仪器结果有助于准确结论的获得； 仪器使用要点 掌握操作流程 规范操作，保存实验结果 正确分析评价结果 维护与保养 课程内容 主要仪器的介绍（用途，操作流程，注意事项，维护保养等） 主要仪器 离心机系列（低速，高速，超速离心机） PCR仪系列（普通，定量，梯度PCR仪等） 化学凝胶成像系统 流式细胞仪 液相芯片分析系统（Luminex 200 ) 显微镜系列（荧光倒置显微镜，正置显微镜） 分光光度计 …… 流式细胞仪 （422室） 流式细胞仪的应用 1、免疫表型分析（细胞） 2、DNA含量及细胞周期分析 3、定量分析 4、细胞功能分析 5、细胞凋亡研究…… 小动物活体成像（420室） 超速离心机（1101）（Optima L-90K Beckman Coulter） 荧光定量PCR仪 是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过参照基因或标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。 qPCR 应用（定量） 基因工程研究领域 1）基因表达研究 2）转基因安全检测 3）单核苷酸多态性(SNP)及突变分析 医学研究领域 1）病原体检测 2）肿瘤研究 3）免疫组份分析 液体闪烁计数仪 液体闪烁计数仪(liquid scintillation counter) 使用液体闪烁体(闪烁液)接受射线并转换成荧光光子的放射性计量仪。 主要测定发生β核衰变的放射性核素，尤其对低能β更为有效。 荧光倒置显微镜 常用仪器介绍 （一）移液器（微量取液） 工作原理： 活塞通过弹簧的伸缩运动实现吸液和放液。 移液器规范操作步骤 第一步－设定移液体积 选取合适移液器（量程范围），调整按钮至所需体积的刻度。 移液器规范操作步骤 第一步－设定移液体积 第三步－吸取液体 垂直吸液； 吸头尖端需 浸入液面3mm以下； 缓慢吸液； 高精度吸液，可先用样液预润吸头内壁2－3次 第四步－放液 移液不准确的原因 自我检测漏气： 移液器的日常维护及保养 需要自我保养的部位 移液器的灭菌 离心机原理 离心机是利用离心力（rcf）对混合液（含有固形物）进行分离和沉淀的一种专用仪器。 当离心力和物质沉淀所需向心力的合力为零时，离心工作结束。 离心机介绍 转速（rpm）：每分钟转头的转数 角速度（?）：每秒钟转过的弧度数 离心机最高转速：标在离心机上的最高转速； 转头最高转速：标在转头上的最高转速； 注意：同一转头在不同型号离心机上最高转速有可能是不同的。 离心力与相对离心力 离心力（F）：取决于转头角速度和颗粒距离心轴的距离； 相对离心力（RCF）：是离心力与重力的比值； 相对离心力与转速的换算： r 建议用最小半径或平均半径，单位为mm。 注意：计算相对离心力可用公式、查表、曲线、作图、离心机的软件。 德国Heraeus 德国eppendorf 德国eppendorf 美国Thermo 转子的种类 固定角转离心特点 水平转子 刹车！ 安全注意事项 离心机的正确使用和保养 离心机与离心机之间至少间隔30厘米,以防干扰离心机散热 离心机远离水槽或其他潮湿的装置 离心过程当中不要试图打开离心机盖 --当然,也不可能打开! 配平 离心机日常清洁与保养--每日必做 每次离心后注意清洁舱体和转子； 打开离心机盖子过夜； 立即用中性剂或软抹布擦拭溅出液体； 高危样品离心:使用者有责任及时清洁和消毒处理！ 超速离心机（1101）（Optima L-90K Beckman Coulter） 超速离心机操作步骤 １. 接通电源，打开离心机盖。 ２. 按要求装配好离心管。 ３. 按要求安装离心转头。 ４. 关上离心机盖。 ５. 输入离心数据，编辑离心程序。 ６. 抽真空，并开始运行程序。 ７. 程序结束后，去真空。 ８. 打开离心机盖，取出转头。 ９. 取出离心管并进行分析。 离心管的选用 玻璃离心管绝对不能在高、超速离心机上使用。 PA管：化学性能稳定，半透明，能耐高温消毒。 PP管：化学性能稳定，半透明，能耐高温消毒。 PC管：透明度好，硬度大，能耐高温消毒。但不耐强酸强碱及某些有机溶剂。主要用于5万(转/分)以上离心。 CN管：质地较软，透明，但不耐强酸强碱及某些有机溶剂，不能高压消毒。