CN107090519-CN201710216968-呼吸道常见病原体多重RTPCR联合基因芯片检测试剂盒.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107090519 A (43)申请公布日 2017.08.25 (21)申请号 201710216968.1 (22)申请日 2017.04.05 (71)申请人 苏州协云基因科技有限公司 地址 215123 江苏省苏州市苏州工业园区 若水路388号D栋601 (72)发明人 王勇强　刘洋　张鑫磊　 (51)Int.Cl. C12Q 1/70(2006.01) C12Q 1/68(2006.01) C12Q 1/14(2006.01) C12Q 1/04(2006.01) C12R 1/93(2006.01) 权利要求书4页 说明书8页 序列表21页 附图2页 (54)发明名称 呼吸道常见病原体多重RT-PCR联合基因芯 片检测试剂盒 (57)摘要 本发明涉及一种呼吸道常见病原体多重RT- PCR联合基因芯片检测试剂盒，该试剂盒使用多 重特异性保守简并引物组合和探针组合检测22 种呼吸道常见病原体中的一种或多种，同时设有 内源对照以及阳性对照和阴性对照。本发明所涉 及的检测试剂盒提高了对高突变病原体目标序 列的覆盖率，避免了多重引物和探针之间非特异 性交叉反应的问题，可实现单个反应体系同时检 测多达20种以上的呼吸道常见病原体，为呼吸道 常见病原体检测提供一种简单灵敏，快速通量 大，可多指标并行检测的检测工具。 A 9 1 5 0 9 0 7 0 1 N C CN 107090519 A 权　利　要　求　书 1/4页 1.一种呼吸道常见病原体多重RT-PCR联合基因芯片检测试剂盒，该试剂盒用于检测以 下病原体中的一种或多种：流感病毒A型、流感病毒B型、副流感病毒1型、副流感病毒2型、副 流感病毒3型、副流感病毒4型、人类偏肺病毒、鼻病毒A型、鼻病毒B型、鼻病毒C型、博卡病 毒、腺病毒、冠状病毒229E、冠状病毒HKU-1、冠状病毒NL63、冠状病毒OC43、呼吸道合胞病毒 A型、呼吸道合胞病毒B型、肺炎支原体、肺炎衣原体、嗜肺军团杆菌和肺炎链球菌； 试剂盒内设有呼吸道病原体的引物组合和探针组合，同时设有人GAPDH基因內源对照 以及阳性对照和阴性对照； 其特征在于引物组合为一组或多组多重特异性保守简并引物(Multiplex  Specific  Conserved Degenerate Primer)组合，其中简并位点的核苷酸表示为R＝A/G，Y＝C/T，M＝ A/C，K＝G/T，S＝C/G，W＝A/T，H＝A/C/T，B＝C/G/T，V＝A/C/G，D＝A/G/T，N＝A/C/G/T，各对 引物的碱基序列5’-3’如下： 流感病毒A型，反向引物5’端带Cy5标志： 正向引物：GCTTTYACNGADGARGGAGCAA， 反向引物：Cy5-5’-AYSYCAAYTGCATTTTTGACATCCT； 流感病毒B型，反向引物5’端带Cy5标志： 正向引物：GCCAATTCGAGCAGCTGAAACTG， 反向引物：Cy5-5’-TCCGTRACYAGTCTAATTGTCTCYCTC； 副流感病毒1型，反向引物5’端带Cy5标志： 正向引物：TCAAACTTAATCACTCAAGGATGTGYAGAT， 反向引物：Cy5-5’-AGAAAYTRCCGGKTTTARATCAGGATACAT；