(精选)【医学课件】 血液生理指标的测定教学课件.pptVIP

* * 实验五、血液生理指标的测定 【目的要求】 1、学习和掌握测定红细胞沉降的方法。 2、学习测定红细胞渗透脆性的方法，理解细胞外液渗透张力对维持细胞正常形态与功能的重要性。 3、学习凝血时间的测定方法。 【基本原理】 红细胞在循环血液中具有悬浮稳定性,但在血沉管中,会因重力逐渐下沉。通常以第1小时末红细胞下降的距离,作为沉降率的指标，简称为血沉。血浆中的某些特性能改变红细胞的沉降率,因此血沉可作为某些疾病检测的指标之一。 正常红细悬浮于等渗的血浆中，若置于高渗溶液内，则红细胞会因失水而皱缩；反之，置于低渗溶液内，则水进入红细胞，使红细胞膨胀。如环境渗透压继续下降，红细胞会因继续膨胀而破裂，释放血红蛋白，称之为溶血。红细胞膜对低渗溶液具有一定的抵抗力，这一特征称为红细胞的渗透脆性。红细胞膜对低渗溶液的抵抗力越大，红细胞在低渗溶液中越不容易发生溶血，即红细胞渗透脆性越小。将血液滴入不同的低渗溶液中，可检查红细胞膜对于低渗溶液抵抗力的大小。开始出现溶血现象的低渗溶液浓度，为该血液红细胞的最小抵抗力；出现完全溶血时的低渗溶液浓度，则为该血液红细胞的最大抵抗力。 血液流出血管后，受到刺激的血小板就会释放出一系列凝血因子，使血中的纤维蛋白原转化成网状的纤维蛋白，血液发生凝固。测定凝血时间可反映血液本身出凝血因子是否缺乏或减少。 【动物、器材与试剂】（以下是每组所需的种类和数量） 150g重的鲤鱼1尾、109mmol·L-1柠檬酸钠（柠檬酸钠（Na3C6H5O7?2H2O）32g，溶于1000 mL蒸馏水中）2 mL、75%酒精5 mL、1%肝素0.1 mL、10种不同浓度的氯化钠低渗溶液（0.25%，0.3%，0.35%，0.4%，0.45%，0.5%，0.55%，0.6%，0.65%，0.9%）各5mL、血沉管（根据动物可采取的血量选择不同长度的血沉管）1支、血沉架1只、注射器及针头2支、干棉球2个、10 mL小试管11支、试管架1只、滴管1支、1 mL移液管1支、吸尔球1只、玻片1块、秒表1块、解剖盘1只、纱布1块、剪刀1把、镊子1把。 注射器，尖针，。 【方法与步骤】 1、红细胞沉降的测定 （1）取血：做好消毒，静脉取血1.6ml，加入含109mmol·L-1柠檬酸钠0.4ml的抗凝管中（抗凝剂与血液比例为1：4），充分混匀。 （2）吸血：将混匀的抗凝血吸入血沉管中至刻度“0”处，搽去血沉管尖端外周的血液并将血沉管直立于血沉架上。血沉管放置要垂直，不得有气泡和漏血。 （3）观察结果：1h末，准确读出红细胞下沉后暴露出的血浆段高度，即为红细胞沉降率。报告该实验动物红细胞的沉降率。并将全班的结果加以统计，用平均值±标准差表示。 2、红细胞渗透脆性的测定 （1）液配制：取10个小试管（小试管要干燥），加入10种不同浓度的氯化钠低渗溶液（0.25%，0.3%，0.35%，0.4%，0.45%，0.5%，0.55%，0.6%，0.65%，0.9%；配制的不同浓度NaCl溶液应准确、无误，NaCl溶液的浓度梯度可根据动物的实际情况适当进行调整）。 （2）制备抗凝血：静脉取血，1%肝素0.1ml可抗10ml血。抗凝剂最好为肝素，其他抗凝剂可改变溶液的渗透性。 （3）加抗凝血：用滴管吸取抗凝血，在各试管中各加一滴（加抗凝血的量要一致，只加一滴），轻轻摇匀（混匀时，轻轻倾倒1～2次，减少机械震动，避免人为溶血），静置1～2h。 （4）观察结果：根据各管中液体颜色和浑浊度的不同，判断红细胞脆性。 ①未发生溶血的试管：液体下层为大量红细胞沉淀，上层为无色透明，表明无红细胞破裂。 ②部分红细胞溶血的试管：液体下层为红细胞沉淀，上层出现透明淡红（淡红棕）色，表明部分红细胞已经破裂，称为不完全溶血。 *