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; 微生物实验室设立目的; 微生物实验室功能; 成功分离病原菌 -标本收集、运送、保存 -标本处理方法 -医务人员专业知识 正确判读微生物培养报告 选择适当治疗方法;;全部检验流程中各分析阶段实验室检验错误; 提供最佳的微生物病原菌发现率,使污染 率降至最低及培养结果容易判读。 提升实验室工作效率及病患照顾质量。 降低医疗成本。 ;需要;标本收集与运送原则;注意生物安全; 标本采集; 标本采集;2. 选择合适的部位采集用于厌氧菌培养的标本,见下表。活检 或针头抽吸物是最佳的选择,一般不要用厌氧菌拭子标本。 决不要把厌氧菌培养的标本冷藏,相反,要在室温下保存。 ;微生物标本接受或拒绝标准及处理方式; 血培养标本;3. 采血量 成人患者建议5-10ml/瓶。 婴幼儿患者建议每瓶不少于2ml。 4. 采血时机 抗菌药物使用之前。 寒战出现时至发热初期采集血培养最佳。 5. 血标本在需氧和厌氧瓶中的分配 推荐以一个需氧瓶和一个厌氧瓶作为常规血培养的组合。 当采血量不能满足推荐采血量时,应首先满足需氧瓶的需要。; 血培养标本; 血培养标本;8. 皮肤消毒 血培养瓶口应以75%酒精的消毒剂处理。 彻底消毒皮肤,并用75%酒精由内往外的方向涂抹去除碘酒液,以避免碘酒污染血培养液。 ; 血培养容器; 血培养容器;1. 血管导管及腹膜透析导管培养是监测血流感染源方法之一。 2. 标准方法:由导管抽取20ml血液,进行血培养;导管周围的皮肤消毒,然后以无菌剪刀取下约5公分长度导管尖,置于无菌容器中送检;再由另一处静脉端抽血进行血培养。 3. 实验室将导管尖于培养基上滚动数次后进行培养,如果菌落数>15CFU/TiP以上,则认为血流感染是可能与导管有关。 ;4. 导管尖于培养基上滚动数次后进行培养,如果菌落数<15CFU,可能有意义分离菌: -白色念珠菌 -金黄色葡萄球菌 -A群链球菌 -革兰氏阴性杆菌 5. 导管血培养阳性时间较静脉血培养早二小时,可能为导管引起的血流感染。 ; 尿液标本; 尿液标本;1. 收集标本中粘液或血液的部分 2. 使用转运培养基或无菌容器运送 ; 粪便标本容器; ???口、组织、厌氧标本;5. 选择合适部位采集用于厌氧菌培养的标本见下表。; 痰标本; 1. 痰革兰染色涂片: 决定标本收集是否适当。 一般上皮细胞>25个/LP(低倍镜视野),认为此标本受口腔污染,培养结果仅供参考。;1. 脑脊液、胸腹水、关节腔液等无菌体液应无菌收集。 2. 最好2ml以上。 3. 无菌体液应做厌氧培养。 4. 脑脊液、生殖道、眼、耳标本不要冷藏。 5. 迅速将标本送至实验室。; 分枝杆菌培养抗酸涂片; 诊断肺结核及分枝杆菌培养结果比较;标本的转运和储存;标本的转运和储存; 细菌培养标本接种须知 ;培养基的质控;培养基质控必须的基本条件;试剂质控;触酶 ;中等大小、黄或灰白、β溶血或不溶血的菌落;G+球菌;G+球菌;G-杆菌;嗜血杆菌;在TCBS平板上见扁平、深绿色、粘有辛辣味的菌落;革兰染色着色不均;念珠菌定位平板应用; 常见革兰氏阴性杆菌的生化反应(氧化酶阴性) ;厌氧标本的接种;厌氧菌鉴定; 肠杆菌科: 当试验粪便中分离的沙门菌和志贺菌株时,只有氨苄西林、喹诺酮和TMP/SMZ可用于常规试验报告。另外,对沙门菌属的肠道外感染分离株,应测试并报告氯霉素和一种三代头孢菌素。 对CSF分离株,头孢噻肟和头孢曲松将取代头孢噻吩和头孢唑啉的试验和报告。 肺炎链球菌: 对脑脊液的肺炎链球菌分离株,应该用可靠的MIC法测试并常规报告青霉素和头孢噻肟或头孢曲松或美罗培南的敏感性。对这些分离株,也应该用MIC法或纸片法测万古霉素的敏感性。对其他部位的分离株,可用苯唑西林纸片筛选试验。如抑菌环直径≤19mm,就应该测试青霉素和头孢噻肟或头孢曲松的MIC。 链球菌属: 对分离自血液与正常无菌部位(如脑脊液、血液、骨髓)的草绿色链球菌,应该用MIC法测试青霉素的敏感性。 青霉素、氨苄西林、左氧氟沙星、氧氟沙星的纸片法解释标准 仅用于β-溶血链球菌。 ;CLSI/NCCLS建议核实抗菌药物敏感性试验结果和确证菌株鉴定 ; 分析后;1.5 下列细菌的耐药特点 ESBLs(超广谱β内酰胺酶) (2010年已修正) 产生的细菌:主要由克雷伯菌属和大肠埃希菌及奇异变形杆菌产生。 耐药特点:对青霉素类,头孢菌素、单环β内酰胺酶类抗生素耐药,即使体外可显示活性但临床应用

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