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肝胆免疫
检验科 张正
提纲
方法学的进展
从甲肝到戊肝检测及研究进展
其它内容:
EBV,CMV,HGV,TTV
一 方法学进展
病原检测
经典方法: 培养 形态电镜
(HBV,HCV均未成功)
免疫学检查 EIA(夹心法,竞争抑制法, 捕获法),RIA
敏感,特异,重复性好。
RIA较EIA敏感103,
但缺点:
污染
半衰期
方法:注意原理,适用范围,评估
分子生物学方法
核酸成分
基因图谱
探针杂交
PCR
序列分析
抗体检测
免疫学方法:EIA,RIA
二 从甲型到戊型肝炎免疫检测
HA
HB
HC
HD
HE
HA
HAV
1993年定名,微小病毒科嗜肝病病毒属
形态:27nm 球型,正20面体,32个壳粒
分子生物学特点:
单股正链RNA,7500bp
特点:
重复利用率150%
全部调控结构位于其内
多变性
检测标志物:
HBsAg,抗-HBs,HBeAg,抗-Hbe,
抗HBc(IgG,IgM),HBV-DNA
临床:
(多样),急性,迁延,慢性,肝纤维化
检测
S Ag HBsAg HBV感染确证标志,各期均可见
Ab 抗HBs 痊愈,免疫成功,保护性抗体
e Ag HeAg 传染性标志常与HBV-DNA共存
Ab 抗Hbe 部分获得免役,临床常稳定, 多有病毒与肝细胞整合
C Ag 不在血内出现,仅肝穿病理能查
Ab 抗HBc 感染标志,与其它配合,特别高浓度应查HBV-DNA
抗HBc-IgM 急性期有助诊断,慢性活动可升高
其它:X系统,PreS1,PreS2
HBV-DNA:阳性是病毒最确切存在标志,定量有助疗效观测
HC
HCV
1998年定名,与人类黄病毒类似
形态:尚缺乏资料
分子生物学特点:单股正链DNA,9500bp
临床:
易慢性化,输血后为主,隐袭,临床常呈地震型
检测:
抗HCV 感染标志
HCV-RNA 病毒存在确证,用RT-PCR检测,不能测Ag
HD
HDV
缺陷病毒,依赖HDV酶系统复制
临床
与HBV感染共存,有流行性,
常引起重症肝炎
检测
HDV,抗HDV 感染标志
HDV-DNA 病毒存在确证,科研
HE
HEV 单股RNA,7500-7600bp,3个开放读码,杯状,与黄病毒属类似,核心32-34 ,表面不平
临床: 急性传染病。危害青壮年。男高于女。较甲肝比,病死率高,传染性低。
检测: HEV PT-PCR
抗HEV 目前感染标志
HEV-RNA 病毒存在 科研
小结
粪口途径:HA,HE
血液途径:HB,HC,HD
另注意病毒核酸分类,主要检测标志的临床意义
三 其它
HGV
20%非甲-戊,1995年,Simons,差式PCR发现。从GB肝炎患者感染黑猩猩后,从急性期动物血清中克隆出2株新病毒。GBV-A,GBV-B,同源27%,与HCV同源47.2-57.0%。
另一组科学家发现GBV-C。
病毒:有包膜,单股正链RNA,直径
GBV A B C
bp 9493 9143 9000
临床:阴袭,有流行性(北京0.1%)
TTV
1997年,日本人报导,DNA病毒
研究结果:正常人携带率22%,独立致病性差,对已有肝炎者的作用不祥。目前尚未承认为独立病毒。
CMV
DNA疱疹类病毒。可独立引起CMV肝炎。
标志检测 抗CMV-IgM(+)。
经血传播。病程3-6月。
EBV
DNA疱疹类病毒。致病因子。
临床致多种病:淋巴肉瘤,鼻咽癌,传单,关节炎,独立致肝炎病毒
检测:抗EBV-IgA,IgM,IgG
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