(精编)【医学课件】中药提取成分对于肿瘤细胞生长的影响分析教学课件.pptVIP

实验十一 中药提取成分对于肿瘤细胞生长的影响分析 指导教师：唐颖 1.实验目的 此综合性实验是通过细胞传代、绘制细胞生长曲线等基础实验来初步检验中药中的某活性成分的抗肿瘤活性。 2.实验原理 MTT比色法的主要原理是；MTT被活细胞中线粒体琥珀酸脱氢酶还原后，生成暗蓝色甲躜，甲躜被助溶剂溶解后，可在酶标仪上读取光吸收值(OD)，在一定范围内光吸收值(OD)与活细胞数量呈线性关系。所以可以通过测量OD值，间接测量活细胞数量。 其他见细胞的传代培养、细胞的生长曲线的绘制等实验内容 3.实验材料、用品 实验材料：Hela细胞，HL-60细胞等多种肿瘤细胞及原代培养的正常细胞。 实验用品：试剂：不同浓度梯度的重要某活性成分溶液。MTT（四甲基偶氮唑盐，5 mg/ml溶于PBS），SDS脱色液：0.01 mol/L HCl，10%SDS或DTW脱色液：1份Triton X—100溶于3份DMF（N, N-二甲基甲酰胺）中，摇匀，然后加2份去离子水，加柠檬酸至终浓度0.2mol/L，调pH至5～6。 其他：见细胞的传代培养、细胞的生长曲线的绘制等实验内容。