紫外吸收光谱法及分子荧光光谱幻灯片.pptVIP

一、基本组成 general process 光源 单色器 样品室 检测器 显示器 1. 光源(提供能量激发被测物质分子,使之产生电子光谱) 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500 nm。 紫外区：氢、氘灯。发射180～400 nm的连续光谱。 2.单色器 将光源发射的复合光分解成波段较窄的单色光的光学系统。 ①入射狭缝：光源的光由此进入单色器,限制杂散光进入单色器内； ②准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束； ③色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅； ④聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝； ⑤出射狭缝。 3.样品室 样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池。 4.检测器 利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍增管。 5. 结果显示记录系统 检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理 分光光度计的类型 types of spectrometer 1.单光束 简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。国产751，722，724 以及Beckman DU-8型都是单光束。 特点；价格便宜，光源波动性较大，主要用作定量分析，不适于定性分析 分光光度计的类型 types of spectrometer 2.双光束 将通过单色器的光一分为二，一束通过参比溶液，一束通过试样，仪器在不同时刻记载参比信号和样品信号。通过一次测量可测得溶液的吸光度。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响。仪器复杂，价格较高。国产710，730和740型都是双光束。 3.双波长 将不同波长的两束单色光(λ1、λ2) 快束交替通过同一吸收池而后到达检测器。测出吸光度差△A 。 特点：无需参比池。只用一个待测试样，完全扣除背景，提高了准确度。 △A =（ ? λ1 - ? λ2 ）cL 优点：不用测量参比溶液，完全扣除了背景，准确度高无需联立方程。 紫外吸收光谱的应用applications of UV 一、定性、定量分析 qualitative and quantitative analysis 1. 定性分析 ?max：化合物特性参数，可作为定性依据； 有机化合物紫外吸收光谱是简单而宽的吸收带,没有精细结构,标志性差。反映结构中生色团和助色团的特性，不完全反映分子特性；用紫外光谱推测分子结构很困难。 标准谱图库：46000种化合物紫外光谱的标准谱图 ?The sadtler standard spectra ,Ultraviolet? 二、有机化合物结构辅助解析 structure determination of organic compounds ?1.1 可获得的结构信息 （1） 200-400nm 无吸收峰。饱和化合物，单烯。 （2） 270-350 nm有吸收峰（ε=10-100）醛酮 n→π* 跃迁产生的R 带。 （3） 250-300 nm 有中等强度的吸收峰（ε=200-2000），芳环的特征 吸收（具有精细解构的B带）。 （4） 200-250 nm有强吸收峰（ε?104），表明含有一个共轭体系（K带)。共轭二烯：K带（?230 nm）；????不饱和醛酮：K带?230 nm ，R带?310-330 nm 260nm,300 nm,330 nm有强吸收峰，3,4,5个双键的共轭体系 1.2 光谱解析注意事项 (1) 确认?max，并算出㏒ε，初步估计属于何种吸收带； (2) 观察主要吸收带的范围，判断属于何种共轭体系； (3) pH值的影响 加NaOH红移→酚类化合物，烯醇。 加HCl兰移→苯胺类化合物。 1.3 分子不饱和度的计算 定义： 不饱和度是指分子结构中达到饱和所缺一价元素的“对”数。 如：乙烯变成饱和烷烃需要两个氢原子，不饱和度为1。 计算： 若分子中仅含一，二，三，四价元素(H，O，N，C)，则可按下式进行不饱和度的计算： ? = （2 + 2n4 + n3 – n1 ）/ 2 n4 ， n3 ， n1 分别为分子中四价，三价，一价元素数目。 作用： 由分子的不饱和度可以推断分子中含有双键，三键，环，芳环的数目