[医药]球毛壳ND35菌株 生物防治 侵染定殖 SCAR Real-time PCR 促生 分子检测论文.docVIP

球毛壳ND35菌株论文：球毛壳ND35菌株在植物上的侵染、定殖检测和对植物生长的影响 【中文摘要】球毛壳菌(Chaetomium globosum)ND35菌株是一株从健康毛白杨(Populus tomentosa)分离出的内生真菌。表现出对多种病原真菌的拮抗活性,其次生代谢物质对多种农作物有较好的促生作用,并且能增强其抗病性。为了解球毛壳ND35菌株在接种植物后的侵染定殖方式和对植物生长的影响以及探索对球毛壳ND35菌株快速、准确的检测方法。本文主要进行了球毛壳ND35菌株在宿主植物杨树上的侵染定殖观察、球毛壳ND35菌株的RAPD特异序列标记转换、ND35对不同植物生长的影响、大田作物接种ND35后的组织分离检测及分子检测、实时荧光定量PCR技术检测球毛壳ND35菌株初探五个方面的研究,取得如下结果:本研究借助光学显微镜和荧光显微镜,结合免疫荧光标记技术,初步研究了球毛壳ND35菌株的菌丝在植物根组织表面侵入的行为和方式,同时借助光镜和透射电镜研究了ND35菌丝在杨树组培苗根内的定殖过程。结果表明:球毛壳ND35菌丝接种24 h后,菌丝从根表皮细胞之间的缝隙侵入根组织;接种48 h后,菌丝定殖于外皮层的细胞间隙;接种72 h后,许多菌丝定殖于杨树根的表皮细胞中。菌丝末端在侵染点形成了附着胞。一... 【英文摘要】Chaetomium globosum ND35 strain is a kind of endophytic fungus isolated from Populus tomentosa. ND35 shows its antagonism against many plant pathogens, and the Secondary metabolites produced by ND35 will promote the growth of plants and induce resistance to plant diseases. In order to understand the mode of infection and colonization on plant by C. globosum ND35 strain and effect on plant growth after inoculation with C. globosum and investigate fast and accurate detection method for C. globosum ND35 strain... 【关键词】球毛壳ND35菌株 生物防治 侵染定殖 SCAR Real-time PCR 促生 分子检测 【英文关键词】Chaetomium globosum ND35 strain Biological control Infection and colonization SCAR Real-time PCR Promoting growth of plant Molecular detection 【目录】球毛壳ND35菌株在植物上的侵染、定殖检测和对植物生长的影响 中文摘要 8-10 Abstract 10-11 1 前言 12-32 1.1 生物防治的概念 12 1.2 生物防治的发展概况 12-13 1.3 毛壳菌概述 13-17 1.4 球毛壳ND35 概述 17-19 1.5 PCR 分子检测技术在植物病害检测中应用 19 1.6 分子标记技术 19-26 1.6.1 限制性片段长度多态性RFLP 21 1.6.2 数目可变串联重复序列VNTR 21-22 1.6.3 任意引物PCR AP—PCR 22 1.6.4 DNA 扩增指纹印迹 DAF 22-23 1.6.5 DNA 指纹技术 23 1.6.6 随机扩增多态性DNA RAPD 23-24 1.6.7 扩增片段长度多态性AFLP 24-25 1.6.8 序列标志位点STS 25 1.6.9 简单重复序列SSR 25 1.6.10 序列特异扩增SCAR 标记及用途 25-26 1.7 实时荧光定量PCR 26-30 1.7.1 实时荧光定量PCR 的分类 27 1.7.2 实时荧光定量PCR 结果评价 27-30 1.8 本研究目的和意义 30-32 2 试验材料与方法 32-45 2.1 试验材料 32-34 2.1.1 供试菌种 32 2.1.2 供试植物材料 32 2.1.3 培养基 32-33 2.1.4 试验试剂 33-34 2.1.5 试验仪器 34 2.2 试验方法 34-45 2.2.1 球毛壳ND35 在宿主植物上的侵染定殖 34-36 2.2.2 生防真菌球毛壳ND35 的RAPD 特异序列的标记转换 36-40 2