[医药卫生]第02章核酸-LJ-new.pptVIP

第 五 节 核 酸 酶 Nuclease 核酸酶是指所有可以水解核酸的酶 依据底物不同分类 DNA酶(deoxyribonuclease, DNase)： 专一降解DNA。 RNA酶 (ribonuclease, RNase)： 专一降解RNA。 依据切割部位不同 核酸内切酶：分为限制性核酸内切酶（Restriction endonuclease）和非特异性限制性核酸内切酶。 核酸外切酶：5′→3′或3′→5′核酸外切酶。 5’ 5’ 3’ 3’ Endonuclease Endonuclease 5’- Exonuclease 3’- Exonuclease 参与DNA的合成与修复及RNA合成后的剪接等重要基因复制和基因表达过程 负责清除多余的、结构和功能异常的核酸，同时也可以清除侵入细胞的外源性核酸 在消化液中降解食物中的核酸以利吸收 体外重组DNA技术中的重要工具酶 生物体内的核酸酶负责细胞内外催化核酸的降解 核酸酶的功能 Ⅱ型限制性核酸内切酶 识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶。 Ⅱ Restriction endonuclease Applied in gene clone 核 酶 催化性DNA (DNAzyme) 人工合成的寡聚脱氧核苷酸片段，也能序列特异性降解RNA。 催化性RNA (ribozyme) 作为序列特异性的核酸内切酶降解RNA。 * * 也是由基本单位重复连接构成的大分子. * 三部分如何连接成核苷酸.嘌呤通过第9位N. * 发现时的年龄,1962年获Nobel Prize. * 提出依据 * 英国物理学家. * 与蛋白质空间结构维持相对应. * 随溶液环境而改变.生理条件和湿度，改变离子强度和湿度。 * DNA实际长度远大于细胞,因而需要浓缩才能容纳.实际演示. * 即为细胞中的存在形式。 * 即为细胞中的存在形式。 * 初步折叠. * 形成方式.核心组蛋白-核心颗粒-串珠样结构. * 进一步折叠.高度压缩. * 进一步折叠.高度压缩. * 功能多样性决定结构和种类多样性. * 部位:胞核.半衰期短. * 甲基化部位. * 原核无帽尾和剪接. * 种类多,分子量小.具有稀有核苷—胸苷 * 二级结构改变，一级结构不变。 * 迅速冷却不易复性。 * Deoxyribonucleases (or DNases) are enzymes that cleave phosphodiester bonds. Some are used for constructive purposes, such as proofreading during DNA replication, whereas others are used to degrade DNA. There are two basic classes of DNases: exonucleases and endonucleases. Exonucleases remove only the terminal nucleotide, whereas endonucleases cleave anywhere within the DNA double helix. * 催化性DNA稳定性好. 核蛋白体的组成 原核生物（以大肠杆菌为例） 真核生物（以小鼠肝为例） 小亚基 30S 40S rRNA 16S 1542个核苷酸 18S 1874个核苷酸 蛋白质 21种 占总重量的40% 33种 占总重量的50% 大亚基 50S 60S rRNA 23S 5S 2940个核苷酸 120个核苷酸 28S 5.85S 5S 4718个核苷酸 160个核苷酸 120个核苷酸 蛋白质 31种 占总重量的30% 49种 占总重量的35% 四 、其他小分子RNA及RNA组学 除了上述三种RNA外，细胞的不同部位存在的许多其他种类的小分子RNA，统称为非mRNA小RNA(small non-messenger RNAs, snmRNAs)。 snmRNAs snmRNAs的种类 核内小RNA（snRNA） 核仁小RNA （snoRNA） 胞质小RNA （scRNA） microRNA( 内源性) siRNA（外源性） 催化性小RNA snmRNAs的功能 参与hnRNA和rRNA的加工和转运、基因表达调控。 microRNA The discovery of miRNAs miRNA was first discovered in 1993 by Victor Ambros at Harvard (lin-4) The second miRNA Let-7