细胞生物学研究方法专题讲座讲解材料.ppt

第三章 细胞生物学研究方法;;;显微镜的发明打开了微观世界的大门;;; 1.显微镜的发明;2.光学显微镜构成： ①照明系统: ②光学放大系统: ③机械装置:镜座.镜柱等 ;经物镜形成倒立实像，经目镜进一步放大成像。;4. 分辨力： D=0.61λ/N．A． 其中λ为入射光线波长；N．A＝ｎsin(α/2 )，为镜口率 , n=介质折射率；α=镜口角（样品对物镜镜口的张角） 。 ; ; 几种介质的折射率;不同光线的波长;光学显微镜的几个光学特点： 制作光学镜头所用的玻璃折射率为1.65~1.78，所用介质的折射率越接近玻璃的越好。 sin α /2的最大值必然小于1；介质为空气，镜口率一般为0.05~0.95；其中低倍镜0.28，高倍镜0.65，油镜1.25，油镜头用香柏油为介质，镜口率可接近1.5。 普通光线的波长为400~700nm，分辨力数值不会小于0.2μm，人眼的分辨力为0.2mm, 因此光学显微镜的最大设计倍数为1000X。;.普通光镜样品的制作:;紫外线发生装置(如弧光灯、水银灯等 );;;荧光显微镜的特殊用途: 用于观察能激发出荧光的结构 免疫荧光观察、基因定位、疾病诊断 细胞与组织中物质的吸收与运输 化学物质的分布与定位等 荧光现象有两种: 自发荧光（叶绿素） 诱发荧光（加荧光素）;