专题1.2 基因工程的基本操作程序（修改2）41PPT.ppt

小环，是质粒，也细菌的核外DNA，能够独立复制 ——谢金辛 【温馨提示】请拿出你的课本，还有最最重要的激情！ 专题1.2 基因工程的基本操作程序 本节聚焦： 简述基本操作 设计转基因生物 一、目的基因的获取 ① 基因文库 ② 利用PCR ③ 人工合成 2、方法 1、定义 A 基因组文库 B 部分基因文库 方法A：基因组文库 方法B：部分基因文库（cDNA文库） IMN 环境：体外 前提：已知目的基因的核苷酸序列 原料： ①引物 ②目的基因 ③聚合酶④dATP dTTP dCTP dGTP 高温变性 适温延伸 退火复性 ②利用PCR 具体过程 ③ 人工合成 不需要模板链 二、基因表达载体的构建 1、目的：使目的基因在受体细中稳定存在，并且可以遗传和表达。 2、过程 常考点： ①限制酶 ②切口数 ③连接酶 3、基因表达载体的组成成分 三、将目的基因导入受体细胞 转化的定义 1、将目的基因导入植物细胞 易感染何种植物？ (1)农杆菌转化法 Ti质粒上的T-DNA有何作用？ (2)基因枪法 常用于何种植物？ （3） 花 粉 管 通 道 法 2、将目的基因导入动物细胞 显微注射法 受体细胞为何物？ 3、将目的基因导入微生物细胞 目的基因储存原核生物中有何优势？ 何为感受态细胞？ 四、将目的基因检测与鉴定 1、DNA分子杂交法 杂交带 何为探针？ 2、分子杂交法 杂交带 3、抗原-抗体杂交法 杂交带 鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定 获取→构建→导入→测定 1.下列有关PCR过程的叙述中不正确的是（ ） A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现 B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成 C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸 D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高 C 3.PCR技术扩增DNA,需要的条件是（ ） ①目的基因 ②引物 ③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等 ⑤mRNA ⑥核糖体 A、①②③④　　 　　B、②③④⑤　 C、①③④⑤　　 D、①②③⑥ A 2.获取目的基因的方法有多种，下列 不属于目的基因获取方法的是（ ） A、从基因组文库中获取 B、从cDNA文库中获取 C、从含目的基因生物细胞中获取 D、利用PCR技术获取 C 2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白“的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因，再将该融合基因转入真核生物细胞内，表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是 A．追踪目的基因在细胞内的复制过程 B．追踪目的基因插入到染色体上的位置 C. 追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布 D．追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构。 C 继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答： （1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是____________________。 （2）进行基因转移时，通常要将外源基因转入__________中，原因 （3）通常采用____________________技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组。 （4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的__________细胞中特异表达。 显微注射技术 受精卵 受精卵（或早期胚胎细胞）具有全能性，可使外源基因在相应的组织细胞中表达。 DNA分子杂交 膀胱上皮 （或早期胚胎） 小环，是质粒，也细菌的核外DNA，能够独立复制