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实验六 质粒在大肠杆菌中的转化和鉴定;一、质粒转化的功用
为实验室获得大量进行基因克隆的质粒。
使携带有目的基因的重组质粒在大肠杆菌中进行表达。;二、原理
热激法：大肠杆菌在 0 ℃ CaCl2低渗溶液中，细菌细胞膨胀成球形，转化混合物中的 DNA 形成抗 DNase 的羟基－钙磷酸复合物粘附于细胞表面，经 42 ℃短时间热冲击处理，促进细胞吸收 DNA 复合物，在丰富培养基上生长数小时后，球状细胞复原并分裂增殖。在被转化的细胞中，重组子基因得到表达，在选择性培养基平板上可挑选所需的转化子。 ;三、材料
E. coli DH5α（或JM105）菌株（已制备感受态），转化用的质粒，无菌1.5mL的eppendorf管
四、仪器
恒温摇床，台式高速离心机，恒温水浴锅， 电热恒温培养箱，超净工作台， 微量移液枪
;思考题：
1.在热激以后进行活化培养，这时的培养基中为什么不加入抗生素？
2.什么是质粒？根据在细菌中的复制，质粒有几种类型？用于基因重组的主要用到哪种质粒？
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