电破法鱼类转殖技术之研发.PDF

生物技術在水產養撞上應用研討會論文集 29 ,47 頁 , 1994 年 電破法魚類轉殖技術之研發 耿全福、龔絃拳打、陳志毅、廖欽峰﹒、黃鵬鵬﹒、吳金ifd ﹒ 中央研究院動物研究所 摘 要 助 輔 之 街 技 物 生 用 利 因 基 性 質 異 來 外 將 , 直接注射或間 接送入受精卵中 , 使此基因能夠錶段於欲研究之生物體遺傳 物質上 , 而達到生物品急改良或基礎研究之目的 , 此種方法 謂之基因轉遞(transgenic) 研究 , 而此帶有異質性基因之動 物種局長 , 就稱之為“基因轉遞動物 。 魚類之基因轉蘊研究 , 已經在娃、縛、鯉、吳郭魚、稻 田魚、斑馬魚、金魚、泥紙上得到成功的轉遍結果。在魚類 基因轉撞上而言 , 原核通常較難察覺 , 而利用顯很注射法較 常使用注射於已受精之卵細胞質中 , 而後再分析此注射入之 特殊基因在魚體上之整合性、表現度與種急遺傳之情形。 實驗室中 , 以電玻法為研究方法 , 以斑是網為轉至直動 物 , 研究電玻法在基因轉蘊之效率性。而利用pmiwZ 以電玻 法轉遞進入斑是網 , 入個細胞期的胚胎中 , 就Baekon 2000 ;q : Tb=0.8sec, Tp 口 、電玻儀器 言 , 其最適宜的參數如下 160 μS, Cy=5cycles, Np=64, D=395, 伏特數為7000 伏 特。而斑慈鋼經電玻徒有 28 % 的存活率 y 其中 22 % 具有 fJ - galactosidase 活性表現 , J1 丕體表現, 為緣故性的分布。 一、別 在許多魚種中 , 體外受精是一種天然的過程 , 而受精後 , 胚胎可以利 用人工繁殖、養成之方式 , 畜養成長。而魚類一次產卵 , 可以產下數十萬 之卵 , 故魚類就轉殖動物之層面而言 , 應屬良好之生物轉殖模式魚種 , 但 情況並非如此。在某些魚種而言 , 受精卵卵分裂期 , 發育非常迅速 , 而很 難達到基因轉殖之目的。許多魚卵 , 卵外包圍著一層硬卵鞘 , 致使利用顯 微注射法之顯微注射長針無法穿透卵鞘之屏障。近年來 , 基