感受态细胞和质粒DNA的转化C.ppt

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lon (long form) 分解异型蛋白质的ATP依赖型蛋白分解酶活性缺失。大肠杆菌B株原来就为lon-。可抑制其表达的融合蛋白质的分解。 omp (outer membrane protein) 外膜蛋白 膜结合性蛋白分解酶活性缺失。抑制表达的融合蛋白质的分解。 宿主蛋白酶缺失 lac Iq (lactose) 乳糖操纵子中控制β-半乳糖苷酶表达的调节蛋白基因。由于lacIq变异,表达调节蛋白过量形成,因此从乳糖启动子开始的转录过程完全受到抑制。 lacZ (lactose) β-半乳糖苷酶活性缺失 lacZ △M15 β-半乳糖苷酶蛋白的w-fragment得到表达。当与多数载体质粒中所具有的α-fragment共同存在时,可使β-半乳糖苷酶的活性回复 (α-互补性)。在含有X-gal的平板培养基上,可以通过蓝白菌的差别选择重组体。 deoR deoR变异,可以选择性地改善大分子DNA的转化。 有利于选择转化体的基因 dut (dUTPase) dUTP酶 dUTP分解酶活性缺失,当dUTP分解酶存在时, dUTP不能掺入到DNA链中。 ung (Urasil-N-glycosylase) 尿嘧淀-N-糖苷酶 尿嘧啶-N-糖苷酶活性缺失。 当具有这种基因时,可以特异性地分解DNA含U的那条链。 mutS (mutator) 突变子 未被甲基化的新合成DNA链的错配序列修复受到阻碍。 有利于点突变的基因 leuB (leucine) 亮氨酸 在最小培养基中必须添加亮氨酸 (Leu) proAB (proline) 脯氨酸 脯氨酸代谢基因变异。在最小培养基中只有添加脯氨酸才能生长。用于确认JM109等大肠杆菌菌株的F因子是否脱落。 Thi-1 (thiamine) 硫胺素 硫胺素代谢基因变异,在最小培养基中必须添加硫胺素。 菌株筛选用基因  LacZ、lac5、  trpE、bio、bio256 从大肠杆菌lac、trp和bio区置换而来  imm80、QSR80 从φ80噬体置换而来  imm434 从φ434噬菌体置换而来  imm21 从φ21噬菌体置而来  int29 从φ29噬菌体置换而来  b2、b1007、b527、b189 B域的缺失突变,使att位点受破坏并因而阻止溶源化  KH52 φ80噬菌体DNA的缺失突变  KH53 类似于λ噬菌体cI区域的φ80噬菌体区域的缺失突变,可有效地防止溶源化  KH54 Rex-cI区域的缺失突变,可有效地防止溶源化  nin5 转录终止位点tR2的缺失突变,可使延迟早期转录不依赖于N基因产物,并且也删除了ral基因附近的BamH I位点  ninL44 转录终止位点tR2的缺失突变,可使延迟早期转录不依赖于N基因产物,并且也删除了ral基因附近的BamH I位点。  WL113 从33 240位的SalI到34 500位的BamH I之间的1,3kb缺失突变,不损伤gam基因,但kil,cⅢ、ssb和ral基因被删除。  sslIλ1-2 从第一到第二个SalI之间的0.5kb缺失突变,gam基因和部分bet基因被删除。 续 上 表 shnd Ⅲ λ2-3 λ噬菌体第二与第三个Hind Ⅲ之间的2.3kb缺失突变,部分b区被删除 sxIλ1o XbaI酶切后经外切核酸酶消化而造成的0.5kb缺失突变 鼠填充片段 大肠杆菌填充片段 lac操纵基因+ 腺病毒DNA 在重组体中将被置换的载体DNA片段 Bluescript M13- 重组入λZAP载体的噬菌粒,当用M13辅助噬菌体感染后,噬菌粒部分可在体内被切下。 lacY、lacZ、lacPO 、lacIq、ampr 插入ΛOPF8的lac和氨苄青霉素抗生基因 Aam、Bam、Eam、 Wam、gamam 可被supE和(或)supF抑制的琥珀突变。 int am Int基因内的BamH I位点被消除后形成的琥珀突变。 Sam7、Sam100 参与溶解细菌细胞膜的一个基因内的琥珀突变。该突变可被supF抑制,但不被supE抑制,失却野生型S基因产物后,引起感染性噬菌体颗粒在细胞内发生积累。 cIts857 使cI基因产物对热不稳定的温度敏感突变 chi 促进λ噬菌体定向重组的特定八核苷酸序列 gam Gam基因编码大肠杆菌recBC外切核酸酶的抑制物,因此可使Q型DNA复制有效地转向滚环复制。Gam基因产物对于λ噬菌体有recA-菌株(Fec表型)和P2噬菌体溶源的recA+菌株(

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