STR—PCR对造血干细胞移植后植入证据的检测.docVIP

STR—PCR对造血干细胞移植后植入证据的检测 中国实验血液学杂志JournalofExperimentalHematology2005;13(1):25—29 文章编号(ArticleID):1009—2137(2005)01—0025—5 ? 25? ? 论着? STR—PCR对造血干细胞移植后植入证据的检测 李素霞,达万明,高春记,朱海燕,王书红,薄剑,靖或,靳海杰 解放军总医院血液科,北京100853 摘要本研究采用STRPCR检测方法,观察比较15例异基因造血干细胞移植术后患者的植入情况.提取15 例异基因造血干细胞移植术患者及其供者移植前的以及患者移植术后的不同时期的外周血或骨髓DNA,PCR扩 增5个具有高度多态性的STR位点,通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染,分析其植入情况.结果表明:15例患 者均有不同程度植入,其中完全供者植入10例,供受者混合嵌合体5例.持续缓解10例,死亡4例,1例复发但仍 存活.混合嵌合体中供者DNA比例的下降预示着早期排斥或复发.Ⅱ度以下急性移植物抗宿主病的发生与混合 嵌合体有明显相关性.结论:STRPCR是分析异基因造血干细胞移植后供体是否植入的灵敏,准确度高的方法, 混合嵌合状态对白血病复发有预警作用.嵌合状态的变化对疾病的治疗有指导作用. 关键词STR—PCR;造血干细胞移植;嵌合体; 中图分类号R457,7;R7305;R733文献标识码A DetectionofEngraftmentEvidenceafterAllogeneicHematopoieticStem CellTransplantati0nbySTR.PCR LISu—Xia,DA一Ming,GA0ChUn-Ji,ZH己,一,WANGShu—ng,B0一Jian, HNGYu,JINHamp;i—Jie DeparZmenZofHemazology,GeneralHospitalofChinaPLA,Beijing100853,China AbstractThepurposeofthisstudywastoobservethechimerastatusof15patientsreceivedallogenelchematopoietic stemcelltransplantationbyusingSTR—PCRmethod.DNAfromperipheralbloodorbonemarrowofdonorsandrecipi— entsindifferenttimewereextracted,5STRlociwithhighpolymorphismwereamplifiedbyPCR.ThePCRproducts wereanalyzedbyPAGEandsliverstaining.Theresultsshowedthat15patientshaddifferentlevelofengraftment.10pa— tientsdisplayedcompletechimerism,fivepatientsshowedmixedchimerism.10patientswerekeepingcontinuanceofre— mission,4patientsdiedandonepatientrelapsedbutstillalive.ThedecreaseofdonorDNAamountsinmixedchimerism foreshowedtheearlygraftrejectionorrelapse.IncidenceofI—IIdegreeaGVHDhighsignificantlycorrelatedwith mixedchimerism.ItisconcludedthatSTRPCRisthesensitiveandaccuratemethodforanalyzingthechimerastatus afterallogeneichematopoieticstemcelltransplantation.Mixedchimerismisapropheticroleforleukemiarelapseandchi— merastatusguidesthetreatment. KeywordsSTR—PCR;allogeneichematopoieticstemcelltransplantation;chimerism JEacpHematol2005;13(1):2529 目前嵌合体的监测已成为异基因造血干细胞移植术 后患者的常规检测项目.移植后植入状态的分析对 于判断移植是否成功,移植后免疫抑制剂的合理使 用,以及供者淋巴细胞的输注密切相关,同时还对移 植物抗宿主病的防治和疾病复发的监测有着重要的 意义.我们