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金属硫蛋白测定方法_银饱和分析法
金属硫蛋白测定方法—银饱和分析法
摘要:本方法是基于Ag十与MT的高亲合力及MT的对热稳定性，向含MT的溶液中加人
过量的Ag十，待反应完全后，再逐次加人血红蛋白，以结合剩余的Ag十，加热使血红蛋白沉淀，与MT结合的Ag+则完全存在于上清液中，通过测定其中Ag+的含量，便可计算出MT的浓度。
金属硫蛋白(Metallothionein，简称MT)是一类分子量约为6000D富含半胧氨酸的金属结合蛋白。1957年Margoshes和Vallee首次在马肾中发现，后经大量研究表明，MT广泛存在于动物的各种组织，真核微生物和原核生物中，在重金属解毒、调节微量元素代谢及清除自由基等方面发挥着重要作用，是已知的清除OH-能力最强的内源性自由基清除剂。故日益受到自由基生物学家和医学家的关注，研制相关的化妆品、保健品及药品也成为极为热门的课题，所以，十分必要建立一种测定MT的准确、快速、灵敏的方法。本文建立的银饱和分析法，不需去除样品中共存的其它蛋白质和含琉基剂，可直接测定其中MT的含量，且不需特殊的仪器设备，操作简便，比紫外吸收法、Ellman‘s试剂法和免疫分析法具有独特的优点，通过对MT制剂中的MT含量的测定，表明该方法具有很高的重现性和准确性。
试剂和仪器
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