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第8章DNA复制和修复教学教案.ppt
第八章 DNA的复制和修复
;第一节 染色体第二节 DNA的复制第三节 原核生物和真核生物DNA的复制特点第四节 DNA的损伤和修复;第一节 染色体;一、染色体(Chromosome) ;Cell cycle ;(二)染色体与染色质;染色体和染色质在化学组成上(DNA和组蛋白等)没有差别,主要在于它们空间构象不同,这也反映了它们在细胞周期的不同阶段有不同功能。;(三)染色体的结构和组成;大肠杆菌染色体长为1333μm,要装入长约为2μm,宽约1μm的细胞中,因此DNA必需以折叠或螺旋的方式存在。;原核生物DNA基因组的特点;
;组蛋白的一般特性:
■ 进化上的保守性
保守程度:H1 H2A、H2B H3 、H4;■无组织特异性
■肽链氨基酸分布的不对称性:N端均为碱性氨基酸。对于H1相反,C端为碱性氨基酸,N端疏水端。
■H5组蛋白的特殊性:富含赖氨酸(24%):两栖类、鱼类和鸟类 中用来替换H1
■组蛋白的可修饰性
;简述真核生物染色体上组蛋白的种类,组蛋白修饰的种类及其生物学意义
中国科学院2003年硕士研究生入学《生物化学与分子生物学》试题; 在细胞周期特定时间可发生甲基化、乙酰化、磷酸化和ADP核糖基化等。H3、H4修饰作用较普遍,H2B有乙酰化作用、H1有磷酸化作用。;H2B; * 组蛋白八聚体(Histone octamer )
H2A与H2B、H3与H4的亲和力强,
通过C端的疏水氨基酸结合;2非组蛋白;功能:;(四)核小体(Nuclearsome); 组蛋白八聚体;Mononucleosomes typically have ~200 bp DNA. End-trimming reduces the length of DNA first to ~165 bp(含组蛋白H1), and then generates core particles with 146 bp.;Chromatosome
166 bp, 2 superhelical turn;连接 DNA
10 to 100 bp
平均 55 bp;The 10 nm fiber is a continuous strong of nucleosomes.; 高度有序
左手螺旋
每圈包括六个核小体 ;Nuclear matrix (核基质), protein complex;从DNA到染色体的过程;(3)真核生物基因组结构特点;■ 不重复序列/单一序列:在基因组中有一个或几个拷贝。真核生物的大多数基因在单倍体中都是单拷贝的。如:蛋清蛋白、血红蛋白等
功能:主要是编码蛋白质。
■ 中度重复序列:在基因组中的拷贝数为101~104。
如:rRNA、tRNA
一般是不编码蛋白质的序列,??调控基因表达中起重要作用 ;■ 高度重复序列:拷贝数达到几百个到几百万个。
●卫星DNA:A ? T含量很高的简单高度重复序列。;第二节 DNA的复制;一、核酸生物合成的一般规律;特异性的聚合酶类催化核酸的生物合成:DNA聚合酶以DNA为模板催化DNA生物合成,称为复制;RNA聚合酶以DNA为模板,催化RNA的生物合成,称为转录。而逆转录酶以RNA为模板,合成DNA。在复制过程中,双螺旋DNA的两条链都作为模板,分别合成两条DNA子链。在转录过程中,双螺旋DNA中只有一条链为模板,RNA聚合酶合成与模板互补的RNA链。
RNA聚合酶进行聚合反应时,能够直接以NTP为底物,逐个聚合,即从头合成RNA。但DNA聚合酶不能催化从头开始合成DNA,必须具有引物,底物dNTP只能加到已存在的RNA或DNA链的3’-OH末端。;二、基 本 概 念 ( Basic Concept ) ;;三、DNA的半保留复制
(Semi-Conservation Replication) ;全保留复制;DNA半保留复制的实验依据:
1958年 Meselson Stahl
E.coli 放射性同位素(15N)标记
CsCl密度梯度离心
;培养一代;15N 标记实验;DNA半保留复制的意义:保证DNA代谢的稳定性。
经过多代的复制,亲代的遗传特征完整无误的传递给子代,子代DNA仍可以保持与最初亲本的一致性。
稳定性是相对的,变异是绝对的; 四、复制起点、方式和方向; 真核生物(Eukaryote) : 多复制起点
即--一个genome中有多个复制单位;; 复制叉(Replication fo
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