第8章DNA复制和修复教学教案.ppt

第八章 DNA的复制和修复 ;第一节 染色体第二节 DNA的复制第三节 原核生物和真核生物DNA的复制特点第四节 DNA的损伤和修复;第一节 染色体;一、染色体（Chromosome) ;Cell cycle ;（二）染色体与染色质;染色体和染色质在化学组成上（DNA和组蛋白等）没有差别，主要在于它们空间构象不同，这也反映了它们在细胞周期的不同阶段有不同功能。;（三）染色体的结构和组成;大肠杆菌染色体长为1333μm，要装入长约为2μm，宽约1μm的细胞中，因此DNA必需以折叠或螺旋的方式存在。;原核生物DNA基因组的特点; ;组蛋白的一般特性： ■ 进化上的保守性 保守程度：H1 H2A、H2B H3 、H4;■无组织特异性 ■肽链氨基酸分布的不对称性:N端均为碱性氨基酸。对于H1相反，C端为碱性氨基酸，N端疏水端。 ■H5组蛋白的特殊性：富含赖氨酸（24%）：两栖类、鱼类和鸟类 中用来替换H1 ■组蛋白的可修饰性 ;简述真核生物染色体上组蛋白的种类，组蛋白修饰的种类及其生物学意义 中国科学院2003年硕士研究生入学《生物化学与分子生物学》试题; 在细胞周期特定时间可发生甲基化、乙酰化、磷酸化和ADP核糖基化等。H3、H4修饰作用较普遍，H2B有乙酰化作用、H1有磷酸化作用。;H2B; * 组蛋白八聚体（Histone octamer ） H2A与H2B、H3与H4的亲和力强， 通过C端的疏水氨基酸结合;2非组蛋白;功能：;（四）核小体（Nuclearsome）; 组蛋白八聚体;Mononucleosomes typically have ~200 bp DNA. End-trimming reduces the length of DNA first to ~165 bp（含组蛋白H1）, and then generates core particles with 146 bp.;Chromatosome 166 bp, 2 superhelical turn;连接 DNA 10 to 100 bp 平均 55 bp;The 10 nm fiber is a continuous strong of nucleosomes.; 高度有序 左手螺旋 每圈包括六个核小体 ;Nuclear matrix (核基质), protein complex;从DNA到染色体的过程;（3）真核生物基因组结构特点;■ 不重复序列/单一序列：在基因组中有一个或几个拷贝。真核生物的大多数基因在单倍体中都是单拷贝的。如：蛋清蛋白、血红蛋白等 　　功能：主要是编码蛋白质。 ■ 中度重复序列：在基因组中的拷贝数为101~104。 如：rRNA、tRNA 一般是不编码蛋白质的序列，??调控基因表达中起重要作用 ;■ 高度重复序列：拷贝数达到几百个到几百万个。 ●卫星DNA：A ? T含量很高的简单高度重复序列。;第二节 DNA的复制;一、核酸生物合成的一般规律;特异性的聚合酶类催化核酸的生物合成：DNA聚合酶以DNA为模板催化DNA生物合成，称为复制；RNA聚合酶以DNA为模板，催化RNA的生物合成，称为转录。而逆转录酶以RNA为模板，合成DNA。在复制过程中，双螺旋DNA的两条链都作为模板，分别合成两条DNA子链。在转录过程中，双螺旋DNA中只有一条链为模板，RNA聚合酶合成与模板互补的RNA链。 RNA聚合酶进行聚合反应时，能够直接以NTP为底物，逐个聚合，即从头合成RNA。但DNA聚合酶不能催化从头开始合成DNA，必须具有引物，底物dNTP只能加到已存在的RNA或DNA链的3’－OH末端。;二、基 本 概 念 ( Basic Concept ) ;;三、DNA的半保留复制 （Semi-Conservation Replication） ;全保留复制;DNA半保留复制的实验依据： 1958年 Meselson Stahl E.coli 放射性同位素（15N）标记 CsCl密度梯度离心 ;培养一代;15N 标记实验;DNA半保留复制的意义：保证DNA代谢的稳定性。 经过多代的复制，亲代的遗传特征完整无误的传递给子代，子代DNA仍可以保持与最初亲本的一致性。 稳定性是相对的，变异是绝对的; 四、复制起点、方式和方向; 真核生物（Eukaryote） : 多复制起点 即－－一个genome中有多个复制单位;; 复制叉（Replication fo