葡萄球菌属的常规鉴定标准规范操作程序.docVIP

葡萄球菌属的常规鉴定标准操作程序 1 概述 葡萄球菌属是一类触媒试验阳性的革兰阳性球菌，包括金黄色葡萄球菌，表面葡萄球菌、腐生葡萄球菌等32个种。是临床最常见的化脓性球菌，广泛分布于自然界中，在人体表面鼻、咽、肠道也经常存在。 2 形态与染色 革兰阳性球菌，直径0.4~1.2μ m成单、双、短链或不规则状排列。在液体培养基浓汁标本中，往往排列成双或短链状多数有鞭毛。 3 培养特性 金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上典型菌落为金黄色，周围有明显的透明（β）溶血环，部分菌落呈橙色，在高盐甘露醇平板上呈橙色菌落。表皮葡萄球菌等其他葡萄球菌在血琼脂平板上菌落为白色或柠檬色，不溶血。 4 生化反应 触酶试验阳性，多数能分解葡萄糖、麦蚜糖、蔗糖和甘露醇。不分解棉籽糖和水杨苷，液化明胶，血浆凝固酶和DNA酶实验分阳性。 5 鉴别要点 5.1 本菌属特征：触酶实验阳性，革兰阳性球菌，葡萄状排列，菌落中等大小，中等干燥。 5.2 与微球菌属的鉴别：触酶实验都为阳性，但O∕F试验葡萄球菌属为发酵型，而微球菌为氧化型或无反应，而且菌体较葡萄菌属更大，排列呈四联状为主。 5.3 与链球菌属的鉴别：葡萄球菌属触酶试验都为阳性，而链球菌为阴性，O∕F试验葡萄球菌属为发酵型而链球菌为氧化型。 5.4 凝固酶阳性葡萄球菌的鉴别见下表。 结合型凝 游离型凝 鸟氨酸脱 菌名 PYP试验 DNA试验 VP试验 固酶试验 固酶试验 羧酶实验 金黄色葡萄球菌 + + - + + - 中间型葡萄球菌 - + + + - - 施氏葡萄球菌 + - + + + - 路邓葡萄球菌 + - + - + + 注：“+”为90%以上菌株为阳性，“--”为90%以上菌株为阳性。 5.5 凝固酶阳性葡萄球菌的鉴别见下表 吡咯烷酮芳基 新生霉素耐药 多黏菌素B耐 菌名 凝固因子 脲酶 甘露醇 蔗糖 酰胺酶（PYR） （5βg） 药300U纸片 表面葡萄球菌 — — + — + - + 腐生葡萄球菌 — — + V + + — 溶血葡萄球菌 + — — V + — — 人型葡萄球菌 — — + — + — — 华纳葡萄球菌 — — + V + — — 模仿葡萄球菌 + — + + + — — 头状葡萄球菌 — — V + + — — 耳葡萄球菌 V — — — V — — 施氏葡萄球菌 + + — — — — — 路邓葡萄球菌 + V V — + — V 注：“+为90%以上菌株为阳性，“—”为90%以上菌株为阴性。 6 细菌鉴定与药物敏感试验 6.1 取平板上菌落直接涂片、革兰染色并镜检，葡萄球菌为革兰阳性球菌。呈单个、成双或葡萄状排列，菌体呈圆形。 6.2 在血琼脂平板上，成圆形、凸起、边缘整齐、表面光滑、湿润德不透明菌落，可产生脂溶性色素，在血琼脂平板上部分葡萄球菌表现为β溶血。 6.3 触酶试验（3%过氧化氢试验）阳性。发酵葡萄糖产酸。 6.4 血浆凝固酶试验（用混合德人血浆）。 6.4.1