99mtc标记的ac133.1单抗对结肠癌的放射免疫显像分析 word格式.docxVIP

目录第一部分 99mTc 标记的 AC133.1 单抗对结肠癌的放射免疫显像研究前 言 2摘 要 7ABSTRACT10材料与方法 15结 果 24讨 论 31结 论 34全文小结 37下一步研究方向 38综 述 39第二部分 99mTc 标记的多肽对 EphA2 受体的靶向研究前 言 56摘 要 60ABSTRACT61材料与方法 63结 果 74讨 论 79结 论 80进一步研究方向及需解决的问题 81致 谢 82附 录 1:论文撰写及发表情况 84附 录 2:中英文缩写对照 85第一部分99mTc 标记的 AC133.1 单抗对结肠癌的放射免疫显像研究前 言结肠癌是世界上最常见的肿瘤之一，是一种死亡率极高的疾病并且发病率在逐 渐上升[1]，术后放化疗是结肠癌治疗的主要方法。尽管临床上采取了许多积极的治 疗措施，许多晚期结肠癌的预后仍然较差。近年的研究显示一群称作肿瘤干细胞（Cancer stem cells, CSC）的细胞的存在是导致肿瘤复发和转移的主要原因[2]。肿瘤 干细胞数量稀少，是具有无限的自我更新能力并能产生异质性肿瘤细胞的一群细胞 [3]，它们在肿瘤的发生、发展及转移中起着重要的作用。肿瘤干细胞对放化疗耐受， 常规治疗难以消除肿瘤干细胞，常常导致肿瘤治疗的失败，因此进一步认识和研究肿 瘤干细胞是肿瘤治疗的重要任务。研究者们发现通过肿瘤干细胞的特异性表面标志物如 CD133、CD44、CD24 和 ALDH 等，利用一些分离手段如免疫磁珠分选法和流式细胞分选法等，可以有效鉴定 和分离肿瘤干细胞。CD133 被普遍认为是肿瘤干细胞的重要分子标志之一，CD133 是一个五次跨膜糖蛋白，分子量 120 kDa，定位于膜突起，有两种亚型，分别是 CD133-1 和 CD133-2。CD133-2 能被抗 AC133-1 单克隆抗体所识别[4]。CD133 的生物学功能 尚不十分清楚，它的一个突出特点就是随着细胞分化，CD133 表达会迅速下调[5]。 它首次在造血干细胞中被发现，后来研究证明它也存在于多种实体肿瘤中，如脑肿瘤 [6]、结肠癌[7，8]、肺癌[9]和胰腺癌[10]等。据报道，结肠癌细胞中分选的 CD133+ 细胞的成瘤能力高于 CD133-细胞[7, 8]，CD133+细胞不仅存在于原发结肠癌组织中， 也存在于转移组织中[11]。Ong 等收集了大量临床标本，发现结肠癌中 CD133+细胞 比 CD133-细胞对化疗耐受[12]。此外还有文献报道，CD133 高表达的癌症患者预后 较差[13, 14]。大量的研究已显示 CD133+细胞具有肿瘤干细胞的特性，CD133 是肿瘤 干细胞比较可靠的分子标志物。分子影像具有无创、实时、活体、特异、精细等优点，我们希望通过分子影像技 术实时监测肿瘤干细胞，为肿瘤干细胞的研究以及肿瘤治疗提供可靠依据。干细胞的分子显像先前已有一些报道，如在 Randall 等的研究中[15]，利用肝干细胞表面特异性表达上皮细胞粘附分子（EpCAM），磁珠标记针对 EpCAM 的特异性抗体后，实现了 用 MRI 体内示踪肝干细胞的目的。前列腺干细胞抗原（PSCA）在前列腺癌中高表达， 124I 标记的 PSCA 特异性微抗体作为一种 PET 显像剂成功显示了 PSCA 阳性的前列腺 癌[16]。AC133.1 是 CD133 特异性抗体，荧光标记的 AC133.1 抗体也最终实现了对结 肠癌肿瘤干细胞的示踪[17]。放射性核素标记单抗进行放射免疫显像具有良好的灵敏度和特异性，是一种常见 的肿瘤显像方法，它能够在肿瘤的定位、定性、分期及疗效评价方面提供有价值的资 料和可靠依据，具有重要的临床意义。在过去几十年，99mTc 标记单抗作为显像剂日益 受到重视[18-22]。因为 99mTc 具有良好的物理性能：半衰期短，来源方便，价格低廉， 辐射剂量低，标记方法简单，甚至可以制备即刻使用的药盒。99mTc 标记单抗作为显像 剂在炎性疾病中的应用已广泛报道，如在 Chianelli M[23]的研究中，七个类风湿关节 炎的患者在英夫利昔治疗前和治疗后注射 99mTc-infliximab 进行显像，发现患者治疗后 关节处呈现不同程度的减低或无变化，因此 99mTc 标记的英夫利昔可用于类风湿关节 炎治疗疗效的评价。再者，99mTc 标记的利妥昔单抗用于乳腺癌患者前哨淋巴结的显像， 结果显示该放射性药物对乳腺癌患者前哨淋巴结的显像非常可靠，对转移性淋巴结的 诊断特异性达到 95%[24]。99mTc 标记单抗作为肿瘤显像剂也有较多报道。血管内皮生 长因子（VEGF）在肿瘤血管生成方面起着重要作用， 99mTc 标记 VEGF 特异性的贝伐 单抗用于乳腺癌移植瘤的显像，肿瘤部位显影清