对骨骼、牙齿dna提取方法的深入研究-法医学专业论文 word格式.docxVIP

5小结..........................................................................................................................39第五部分..............................................................................................................................39真实案例分析（一）...................................................................................................39真实案例分析（二）..................................................................................................41参考文献................................................................................................................................................. 42综述...................................................................................................................................................... 43致谢...................................................................................................................................................... 51在学期间承担/参与的科研课题与研究成果.............................................................................. 52个人简历................................................................................................................................................. 53对骨骼、牙齿 DNA 提取方法的深入研究摘要目的:本课题旨在对法医检案中骨骼和牙齿这两种特殊检材进行DNA检测，通过对不同脱钙剂、消化液的深入研究，采用SPSS 软件分析比较不同提取方法的骨骼DNA 浓度值，寻找最合适的脱钙剂和消化液，建立一套程序相对简单、结果准确、清晰可靠，DNA提取效率高的提取方法。方法:1 用不同的酸类脱钙液（自制10%盐酸脱钙液、10%硝酸脱钙液、硝酸和甲酸混合脱钙液、甲酸脱钙液、HAS改良脱钙液）对骨粉采用常规方法（脱钙，消化、纯化、扩增、3130XL遗传分析仪等的一系列过程）进行DNA分型图谱分析；2用不同浓度的EDTA脱钙液（0.25mol/L、0.5mol/L、1mol/L）对骨粉进行脱钙，每组脱钙时间严格按编号从小到大采用3h、6h、12h、24h分别进行。各组脱钙完毕后均采用同种方法消化、纯化、DNA 浓度测定、扩增、3130XL遗传分析仪进行DNA 分型图谱分析，寻求最合适的EDTA脱钙液浓度和作用时间；用三种不同种类的消化液（CTAB、Boneincubationbuffer、QIAampDNA Investigator）对骨粉进行消化，纯化、DNA浓度测定及SPSS软件统计分析、扩增、3130XL遗传分析仪进行DNA图谱分析，找到最合适的消化液；用三种不同的消化液（CTAB、Boneincubationbuffer、QIAampDNAInvestigator）对牙齿消化，纯化、扩增、3130XL遗传分析仪进行DNA图谱分析，目的是为了证明同样的硬组织采用上述方法进行提取，同时对上述方法予以验证。结果:1 通过严格配制的酸性溶液虽然对组织及细胞均有很强的脱钙作用，但是也对DNA具有很强破坏作用，因此得到的DNA量也相对很少甚至破坏彻底，根本得不到完整的DNA分型。2 在3h-24h时间段内，