具有潜在益生特性发酵乳杆菌的筛选-食品工程专业论文 word格式.docxVIP

目录1 引言 11.1益生菌与乳酸菌概述 11.2发酵乳杆菌的生物学特性 11.3发酵乳杆菌的生理功能 21.3.1发酵乳杆菌的免疫调节作用 21.3.2发酵乳杆菌对致病菌的拮抗作用 21.3.3发酵乳杆菌度降低血清胆固醇含量的作用 31.3.4发酵乳杆菌的抗氧化作用 41.3.5发酵乳杆菌的其他作用 41.4发酵乳杆菌的应用 41.4.1发酵乳杆菌在食品发酵中的应用 41.4.2发酵乳杆菌在临床医学上的应用 51.4.3发酵乳杆菌在发酵饲料中的应用 51.5课题研究的意义及主要内容 61.5.1课题研究的意义 61.5.2 课题研究的主要内容 62材料与方法 62.1试验材料与仪器设备 62.1.1试验菌株 62.1.2主要试验试剂以及培养基 62.1.3试验仪器 72.2试验方法 72.2.1菌株活化及供试菌液的制备 72.2.2耐酸性菌株的筛选 72.2.3模拟胃液耐受性试验 72.2.4模拟胃肠液转运耐受性试验 82.2.5胆盐耐受能力测定 82.2.6抑菌特性研究 82.2.7凝集特性研究 82.2.8表面疏水特性的测定 92.2.9数据分析 93结果与分析 93.1耐酸性菌株的筛选 93.2模拟胃液耐受性 103.3模拟胃肠液转运耐受性 113.4胆盐耐受性试验 133.4.1不同胆盐浓度耐受性试验 133.4.2胆盐延迟时间结果分析 143.5两株发酵乳杆菌 pH 2.0/pH 8.0 胃肠转运试验 173.6抑菌特性试验 193.7凝集特性试验 203.7.1自凝集试验结果 203.7.2交互凝集试验结果 213.8疏水特性实验结果 224结论 23致谢 24参考文献 25附图 31附表 32作者简介 351 引言1.1益生菌与乳酸菌概述益生菌(Probiotic)作为活的微生物，可以通过改善宿主的肠道微生物平衡，从而 使宿主获益[1]。目前，最常用作益生菌的微生物主要为乳酸菌、酵母菌及真菌[2]。2001 年 10 月 FAO/WHO 专家咨询会议对益生菌一词精简定义为：益生菌是指通过摄入适 当量从而对宿主产生有益作用的活菌[3]，这种不包含具体机制的定义成为益生菌的最 适定义。1989 年美国食品管理及药物管理局(FDA)将益生菌列为公认安全(GRAS)等 级，使益生菌使用无安全顾虑。各国家对益生菌及相关产品的立法和管理均有不同[4]。 目前被认定的益生菌约有 40 多种，Tannock[5]将益生菌分为细菌及真菌两大类。益生 菌不仅能够加工成各类食品通过消化道发挥有益作用,还可以外用于同样存在固有菌 群的泌尿系统和皮肤[6,7]。益生菌的常见功能主要包括：平衡肠道菌群、对抗感染、 缓解乳糖不耐受症、降低胆固醇、抗肿瘤、增强机体免疫力等[8-12]。近年来的研究热 点主要集中于胃肠道疾病、外科及妇科感染、粘膜免疫、癌症、过敏、肥胖以及抗生 素低残留的相关病症上[13-15]。乳酸菌(Lactic Acid Bacteria，LAB)是指能够发酵碳水化合物，以乳酸为主要产物 的细菌。乳酸菌是一类革兰氏阳性、不产芽孢的球菌或杆菌。乳酸菌营养需求复杂， 有厌氧、微好氧或兼性厌氧型，乳酸菌广泛存于自然界，有关其分类鉴定界线仍有许 多争议。若依其发酵产物的种类可分为只产生乳酸的同型发酵及生成乳酸、醋酸、乙 醇、二氧化碳等多种产物的异型发酵两类。乳酸菌中属于乳杆菌属的有 50 多个不同 的种,其中常用于传统以及工业发酵食品中的主要乳杆菌有:干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)、 德氏乳杆菌(Lactobacillus delbruckii)、卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)等[16]。1.2发酵乳杆菌的生物学特性发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)属于乳杆菌科中的乳杆菌属，为异型发酵乳 杆菌，最适生长温度为 30～37℃。在 MRS(Man Rogosa Sharpe Broth)琼脂培养基上 37℃厌氧培养生长时，菌落直径约为 lmm，有光泽、圆顶不透明。发酵乳杆菌广泛分 布于植物以及动物的胃肠道中[17]。对于发酵乳杆菌的鉴定，如果采用表型、酶联反应和糖发酵试验方法比较困难， 因为传统的发酵试验中，罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)和发酵乳杆菌的表型非常 相近，结果达不到鉴定所要求的菌种特征。与传统的生理生化鉴定方法相比，使用常 规的分子生物学方法，如 16S rRNA 基因序列测定可更加准确快速鉴定，而且