20140903植物组织培养植物组织培养的培养条件.ppt

* 1956年，米勒（Miller）与斯库格（Skoog）一起提出了植物激素控制器官形成的观点 * 最早是由日本植物病理学家研究水稻恶苗病(Rice bakanae)时发现的,它是指具有赤霉烷骨架,并能剌激细胞分裂和伸长的一类化合物的总称. * 富盐平衡培养基：是目前使用最广泛的一类，代表性的培养基有MS、LS、BL、BM、ER等。特点是：无机盐浓度高，微量元素种类齐全，浓 LS、BL、BM、ER等。特点是：无机盐浓度高，微量元素种类齐全，浓度高；元素间比例适当，离子平衡性好，具有较强的缓冲能力、稳定性好、营养丰富，一般培养时无需再加入有机成分 低盐培养基：代表性培养基有 White、WS、HE、HB。特点是：无机盐 有机成分含量浓度低 多用作生根培养的培养基 中盐培养基 代表性培养基有Nitch Miller H , 大多是在MS培养基基础上进行改良设计。特点是：大量元素无机盐为MS的一半，微量元素种类减少、含量增高。维生素种类比MS增多，例如增加了生物素、叶酸等 * 高硝态氮培养基：代表性培养基有B5、N6、SH。特点是：硝酸钾浓度高，氨态氮浓度低，含有较高浓度的硫胺素（VB1） * 在国内已广泛应用于小麦、水稻及其他植物的花药培养和其他组织培养。 * * 通常需要等前一种化合物完全溶解后再加入后一种化合物，对于易发生沉淀的试剂单独溶解后再与别的已完全溶解的药品混合，同时要慢慢地混合，边混合边搅拌。如大量元素中的硫酸镁、磷酸二氢钾和氯化钙 * * IAA、IBA、GA、ZT先溶95%酒精再定容； NAA先溶于热水, 95%酒精再定容； 2，4-D先溶于1 N NaOH,再定容； KT、BA先溶于1 N HCl,再定容。 * 高温灭菌会降低pH值(约0.2—0.3个pH值)，因此在配制时常提高pH值0．2—0．3单位。 MS培养基特点： 无机盐浓度高、元素间比例适当,离子平衡性好，具有较强的缓冲性，是目前使用最广泛的培养基。 无机盐、有机成分含量较低，适用于生根培养。 White培养基特点： 一、常用培养基特点 B5培养基 特点： 含较高的NO3-N，氨态氮含量较低，含有较高的硫胺素（VB1）较适用于一些要求较高氮素营养的植物培养，如常见木本植物双子叶植物组培的选择 一、常用培养基特点 N6培养基特点： 成分简单，KNO3 和 (NH4)2SO4含量高，适合花药培养,尤其适合禾本科植物的组织培养。 一、常用培养基特点 第三节 培养基的配制 二、培养基制备 （一）母液配制与保存 （二）培养基配制 Murashige and Skoog (MS ) Medium Macro elements Micro elements (0.5mmol/L) (0.5mmol/L) MgSO4.7H2O 0.37 g/L KI 0.83 mg/L NH4NO3 1.65 g/L H3BO3 6.2 mg/L KNO3 1.9 g/L MnSO4.4H2O 22.3 mg/L CaCl2 0.33 g/L ZnSO4.7H20 8.6 mg/L KH2PO4 0.17 g/L Na2MoO4.2H2O 0.25 mg/L CuSO4.5H2O 0.025 mg/L CoCl2.6H2O 0.025 mg/L Na2.EDTA 37.3 g/L