分析化学 第9章 色谱法概论.pptVIP

色谱法概论 药物分析教研室 第一节 概述 第二节 色谱过程及常用术语 第三节 色谱法基本原理 第四节 色谱分析定量方法 要求 掌握各种色谱技术的基本原理 熟悉判断分离效率的指标 熟悉色谱术语 掌握定量分析计算方法 第一节 概 述 一、色谱法的发展 二、色谱法的分类 一. 色谱法的发展 1. 定 义 2. 起源与发展 3. 优 点 4. 缺 点 1. 定 义 色谱法（ chromatography)——分离分析混合物的一种有效的物理和物理化学方法。 2.起源与发展 1906年——Tswett→创立四十年代——Martin→发展方法五十年代——Martin 、synge、 Van deemter→建立理论六十年代——Horvathc→ HPLC 3. 实 质：一种物理分离方法 4. 机 理：欲分离混合物在两相间发生分布 固定相：有巨大表面积的固定床 流动相：通过或沿着固定床渗滤的流体 色谱法的原理主要是利用物质在流动相与固定相之间的分配系数差异而实现分离。 色谱法存在三要素：待分离的混合物、固定相和流动相。 （1）与光谱法比较 色谱法与光谱法的主要区别在于色谱法具有分离及分析两种功能，而光谱法不具备分离功能。 （2）与其他分离方法比较 与其他分离方法，如蒸馏、结晶、沉淀、萃取法相比，色谱法具有极高的分离效率. 不仅可使许多性质相近的混合物分离，还可使同分异构体获得分离. 已成为各种实验室的常规手段，是分析化学的重要分支。 二、色谱法的分类 1.按两相所处状态分类2.按分离过程机理分类3.按操作形式分类 1.按两相所处状态分类 气－固色谱(GSC) 气相色谱 流动相 (GC) 气－液色谱(GLC) 液－固色谱(LSC) 液相色谱 (LC) 液－液色谱(LLC) 2.按分离过程机理分类 吸附色谱：吸附性能差异 分配色谱：流动相和固定相间的分配系数（或溶解度）不同 键合相色谱法：吸附＆分配 离子交换色谱：离子交换能力不同 凝胶排阻色谱：分子尺寸大小不同而阻滞作用不同 毛细管电泳法：以高压直流电场为驱动力，含有液体介质（电解质溶液）的毛细管为分离通道，利用样品中不同带电组分的电泳淌度的差别，而进行的一种分离分析方法。 毛细管电色谱法：以在高压直流电场中所产生的电渗流为驱动力，毛细管色谱柱为分离通道，依据样品中不同组分的分配系数及电泳淌度的差别，而进行的一种分离分析方法。 3. 按操作形式分类 填充柱色谱法 柱色谱法 毛细管柱色谱法 纸色谱法 PC 平面色谱法 薄层色谱法 TLC 4.按使用目的分类 （1）分析用色谱 （2）制备用色谱仪 （3）流程色谱 第二节 色谱过程 及常用术语 一、色谱过程 二、常用术语 三、色谱流出曲线上的重要信息 一.色谱过程 1.分配平衡 2.分配系数K 3.容量因子k 4.保留值R——保留因子（比） 5. K、k、R的关系 1. 分配平衡 2.分配系数K 分配系数：在一定温度和压力下，组 分在固定相和流动相之间分配达平衡 时的浓度之比值，即 物理意义：溶质在互不相溶的两相中达 到平衡时，在两相中的浓度之比为常数 色谱过程 是物质在相对运动着的两相间分配平衡的过程。 若混合物中二个组分的分配系数不等，则被流动相携带移动的速度不等，而被分离。 分配系数不等是分离的前提。 分配系数K与组分的性质、溶剂的极性、温度等因素有关。在给定条件下，组分性质不同，K也不同。 K可适用于多种机理，不同的色谱机理中K的含义不同：在吸附色谱中，K为吸附平衡常数，在离子交换色谱中，K为交换常数或称选择系数。 不论是离子交换过程、溶解过程、吸附过程，K值都决定于二相中组分的相对粒子数。 如果K值大，则固定相中的粒子数比流动相中的粒子数多。从总体平均来看，这一组分的分子在固定相中停留的时间更长。 3. 容量因子k 指在一定温度和压力下，组分在两相间分配达平衡时，分配在固定相和流动相中物质的量的比。又称分配比，即 4.保留因子(比) R’ ——保留值 定 义