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fe3cn-氰化高铁细胞色素氧化酶cytaa3
KCN中毒与解救机制 KCN中毒与解救机制(续) 立即记录给药时的时间,观察比较两鼠的表现 ,直到动物死亡为止,记录其存活时间(min),余处理方法同乏氧性缺氧。美兰的解救机制:美兰是还原剂,可将高铁血红蛋白还原为亚铁血红蛋白。 取体重一致的1对小鼠用于氰化钾中毒实验:先观察小鼠正常的呼吸和皮肤黏膜颜色,接着按以下方式进行连续三次或两次腹腔注射,其中一只注射0.1% KCN后立即注射1%NaNO2 ,还有10% Na2S2SO3 ,另外1只注射0.1%KCN后立即注射生理盐水。 立即记录给药时的时间,观察比较两鼠的表现 ,直到动物死亡为止,记录其存活时间(min),余处理方法同乏氧性缺氧。 KCN中毒的机制: KCN对线粒体内呼吸链的细胞色素氧化酶具有很高的亲和力,氧化型细胞色素氧化酶与CN-结合后便失去传递电子的能力,以至氧不能被利用、氧化磷酸化受阻。 KCN中毒的解救机制:先给予高铁血红蛋白形成剂,迅速将体内部分血红蛋白氧化形成高铁血红蛋白,后者与游离的氰离子结合或夺取已与细胞色素氧化酶结合的氰离子,形成氰化物高铁血红蛋白,使细胞色素氧化酶复活;再给予硫代硫酸钠,与体内游离的或已结合的氰离子相结合,形成稳定性强﹑无毒的硫氰酸盐,由尿排出而解毒。 还剩最后1只小鼠,作为正常对照,采用颈椎脱臼方式处死,此后处理方法同乏氧性缺氧。最后,比较7只小鼠的血液、肝脏以及皮肤黏膜的颜色。 实验对动物的操作基本结束,实验里要注意以下这些问题(1)…;(2)…;(3)…; (4)…;(5)…。提醒大家,小鼠较多,做好记录,勿混淆。 实验结果是实验报告的重点之一,本实验要求以文字描述结合下面的表格列出实验结果,并根据表2结果,进行统计学处理和显著性检验。 将不同类型缺氧的实验结果填入表1,包括呼吸变化,皮肤粘膜、血液、肝脏颜色,存活时间,各组平均存活时间。 各实验小组将不同类型缺氧小鼠的存活时间填入表2,并计算平均值。 实验讨论亦是实验报告的重点之一,分析讨论缺氧实验中各种现象发生的机理、以及分析实验成功失败的经验教训。 缺氧的综合实验主要观察不同类型的缺氧对小鼠的影响。 小鼠死亡后,立即打开小鼠胸、腹腔,用含0.1mL肝素生理盐水的1mL注射器从小鼠心脏抽取0.2~0.3mL血液,混匀,保留此含有抗凝血的注射器及小鼠,用于后面进一步观察比较不同实验小鼠血液、皮肤和肝脏的颜色。 机能实验学 缺氧的综合实验 不同类型的缺氧对小鼠的影响 内 容 实验目的 1 实验步骤 2 注意事项 3 实验结果 4 讨论 5 实验目的 利用实验动物复制上述乏氧性、血液性和组织中毒性缺氧模型,并观察不同类型缺氧对动物呼吸的影响、缺氧时血液颜色的变化。通过实验掌握不同类型缺氧模型复制的方法和原理,熟悉有关抢救的机理。 实验步骤 1 取小鼠7只,称重,分别以黄色三硝基苯酚(又称苦味酸)溶液标号,取体重一致的2对小鼠留在后面用于亚硝酸钠中毒、氰化钾中毒的实验,其余3只鼠用于其他实验; 实验步骤 2 (1) (2) 先取1只小鼠,观察其正常的呼吸和皮肤黏膜颜色,即将其放入盛有定量钠石灰的缺氧瓶内; 塞紧瓶塞,记录时间,每隔5分钟重复观察,直到动物死亡,记录其存活时间(min)。 乏氧性缺氧 NaOH ?CaO Wide-mouth bottle 实验步骤 2 (3) 立即打开小鼠胸、腹腔,并用含0.1mL肝素生理盐水的1mL注射器从小鼠心脏抽取0.2~0.3mL血液并混匀,保留此含有抗凝血的注射器及小鼠以用于后面进一步观察比较不同实验小鼠血液、皮肤和肝脏的颜色。 乏氧性缺氧(续) 实验步骤 3 一氧化碳中毒性缺氧 (1)将一只小鼠放入与CO发生装置连接的500mL广口瓶内(见左图,观察其正常表现,再盖好瓶塞。 实验步骤 3 一氧化碳中毒性缺氧(续) (2)在试管中加入甲酸3mL,然后再加上2mL浓硫酸,塞紧瓶塞,此时即有CO产生。 3ml methanoic acid (HCOOH) + 2ml concentrated sulfuric acid (H2SO4) 实验步骤 3 一氧化碳中毒性缺氧(续) (3)余观察指标与处理方法同乏氧性缺氧。 实验步骤 4 亚硝酸钠中毒性缺氧 (1)取体重相近的一对小鼠,称重,观察正常表现 后,按以下方式每鼠分别给予连续两次腹腔注射: 0.3ml 5%NaNO2 0.3ml 5%NaNO2 + 0.2~0.3ml 1% 美兰 + 0.2~ 0.3ml NS 实验步骤 4 亚硝酸钠中毒性缺氧(续) (2)立即记录给药时间,观察比较两鼠表现 ,直到 动物死亡,记录其存活时间(min)。 (3)余处理方法同乏氧性缺氧。 解救机制: Hb-F
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