11.第十一章 DNA生物合成 (复制) .pptVIP

(三)双向复制 1.原核生物复制时，DNA从起始点向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制。 2.真核生物每个染色体有多个起始点，是多复制子的复制。习惯上把两个相邻起始点之间的距离定为一个复制子。复制子是独立完成复制的功能单位。 1.DNA-pol的核酸外切酶活性和及时校读 2.复制保真性的碱基选择 a) DNA聚合酶靠其大分子结构协调非共价(氢键)与共价键(磷酸二酯键) 的有序形成。 b) 嘌呤的化学结构能形成顺式和反式构型，与相应的嘧啶形成氢键配对，嘌呤应处于反式构型。 1.真核生物每个染色体有多个起始点，是多复制子复制。复制有时序性，即复制子以分组方式激活而不是同步起动。 2.复制的起始需要DNA-polα（引物酶活性）和polδ（解螺旋酶活性）参与。还需拓扑酶和复制因子(replication factor, RF)。 3.增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen, PCNA)在复制起始和延长中起关键作用。 3? 5? 5? 3? 领头链 3? 5? 3? 5? 亲代DNA 随从链 引物 核小体 (二)复制的延长 真核生物的聚合酶δ催化子链的延长，并有校正功能。引物和冈崎片段 (约200bp) 都比较短。 * (DNA Biosynthesis，Replication) 第十一章 DNA的生物合成 (复制) 复制是指以亲代DNA为模板合成子链DNA的过程。 A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C C C A C T G G G G T G A C C A G G T A C T G T C C A T G A C T C C A T G A C A G G T A C T G A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C A G G T A C T G C C A C T G G T C C A T G A C G G T G A C C + 亲代DNA 复制叉 子代DNA (Basic Rules and System of DNA Replication ) 第一节 复制基本规律与体系 复制的方式——半保留复制 固定起始点 双向复制 半不连续复制 复制的高保真性 基本规律 一、复制的基本规律 (一)半保留复制 1.概念 DNA合成时，以亲代DNA解开的两股单链为模板，按碱基配对规律，合成子代DNA的过程。子代DNA，一股单链来源于亲代，另一股单链为新合成。子代和亲代的DNA碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。 (1)密度梯度实验 ——实验结果支持半保留复制的设想。 含重氮-DNA的细菌 培养于普通培养液 第一代 继续培养于普通培养液 第二代 梯度离心结果 2.半保留复制的实验依据和意义 (2)子链继承母链遗传信息的几种可能方式 全保留式 (混合式) 半保留式 按半保留复制方式，子代DNA与亲代DNA的碱基序列一致，即子代保留了亲代的全部遗传信息，体现了遗传的保守性。是物种稳定性的分子基础，但不是绝对的。 (3)半保留复制的意义 复制中的放射自显影示意图 环状双链DNA及 复制起始点 B. 复制中的两个复制叉 C. 复制接近终止点 ori ter A B C (二)固定起始点 复制是从具有特异碱基序列的复制起始点开始。原核生物(一个起始点)，真核生物(多个起始点)。 5’ 3’ ori ori ori ori 5’ 3’ 5’ 5’ 3’ 3’ 5’ 5’ 3’ 复制子 3’ (四)复制的半不连续性 3? 5? 3? 5? 解链方向 3′ 5′ 3′ 3′ 5′ 领头链 (leading strand) 随从链 (lagging strand) 顺解链方向生成的子链，复制为连续进行，称为领头链。 另一股链复制方向与解链方向相反，不能顺着解链方向连续延长，称为随从链。 复制中不连续片段称为岡崎片段(okazaki fragment)。 领头链连续复制而随从链不连续复制，就是复制的半不连续性。 A：DNA-pol的外切酶活性切除错配碱基；并用其聚合活性掺入正确配对的底物。 B：碱基配对正确， DNA-pol不表现活性。 DNA-polⅠ 外切活性 聚合活