真菌基础检验培训讲解.pptVIP

欢迎进入真菌世界;临床真菌学及医学真菌检验技术进展---;临床真菌学---研究真菌病诊断和治疗的临床学科;临床真菌检验学技术;感染是一个永远都不能忽视的话题感染病原菌的动态变化;医院真菌感染不容忽视;主要原因：频繁使用免疫抑制疗法、抗癌和器官移植、 骨髓移植，过度使用广谱抗生素 、免疫功能低下、糖尿病、烧伤、静脉高营养、 接受造血干细胞移植的个体。 主要感染真菌为：酵母或酵母样菌（白念珠菌为主，其次为曲霉菌、隐球菌、接合菌属） 80年代唑类药物的出现，对念珠菌血症的病原菌分布产生了影响，非白念珠菌引起的感染增多。 自然界广泛存在的腐生真菌通过外伤侵入人体，引起的少见真菌感染不容忽视，因其对免疫缺陷的个体危害更大，常导致严重的系统感染。;全球性侵袭性真菌病的流行病学改变 白念珠菌所引起的感染仍占首位，但非白念珠菌的感染比重增多。主要为光滑、热带、近平滑和都柏林念珠菌等，其他酵母菌如毛孢子菌，红酵母，Pichia anomala (必赤酵母), 马拉色菌、酿酒酵母等。 引起透明丝孢霉病的菌种的改变，除暗色真菌外，镰刀菌、拟青霉属、波氏霉样菌、枝顶孢等正在增多。以往常引起皮下感染或过敏性窦炎，但近年常见引起系统性感染和播散性感染并威胁生命。这些病原菌一些是嗜神经的并且常引起正常人或衰弱病人中枢神经系统感染。 地方流行性双相真菌：播散性马尔尼菲青霉病是东南亚艾滋病人的第三大特征性真菌感染病。但此菌的自然界分布情况尚不清楚，竹鼠是自然宿主，但与人类疾病的关系尚不清楚。;美国医院内血液感染10种最常见的分离出的病原菌 (Dian Microbiol Infect Dis,1998;30:121-129); ;北京协和医院统计3447例尸解的深部真菌感染率;华西医科大学附属一院1988.1～1997.12医院真菌感染调查结果;我们所面临的任务;条件致病真菌感染危险因素;流行病学—病原菌;我国系统性真菌感染的致病菌;条件致病菌;念珠菌的感染—注意非白念珠菌的增多;医院真菌感染菌种分布 （北京大学第一医院）; 医院真菌感染菌种分布 （华西医科大学第一附属医院）;尿培养阳性标本中念珠菌菌种分布（北??大学第一医院）;-----新出现的病原菌相对带给真菌工作者的问题;医学真菌学面临严峻挑战----;医学真菌检验工作者面临机遇和挑战;真菌感染流行病学——探讨危险因素，了解病原菌类别;真菌感染逐年增加带来问题：;深部真菌感染目前存在的问题;了解病原真菌生物学特性—至关重要;从临床标本中发现真菌并确定其意义;机会性真菌感染;——检验工作者首先应该了解 真菌的概念、分类、结构及特征。 真菌的有性生殖、无性生殖。 真菌的致病性（毒素、致敏性、侵入性） 宿主的抵抗力;真 菌 的 概 念;真菌在生物界的地位;真菌的致病方式;病原真菌的常见检验方法 常用器械和材料 直接镜检法 培养法 血清学方法 分子生物学鉴定方法 ;真菌的直接镜检技术常用器械;皮肤取材方法;湿片法 1 氢氧化钾法 KOH: 10~30g dH2O: 100mL 长期保存可加入10~20%的甘油（丙三醇） 2 复方氢氧化钾法 KOH: 10g DMSO: 40mL 甘油：5mL dH2O: 加至100mL 3氢氧化钾刚果红法 A液：刚果红100mg, dH2O100mL B液： KOH10g， dH2O100mL 染色时A先染1~2min，如角质层较厚再加1滴B液，加盖玻片观察。;实验室诊断方法;染色法 糖原染色法（PAS法）： 革兰氏染色法 抗酸染色法 镀银染色法 瑞氏-姬氏染色法：主要用于荚膜组织胞浆菌和马尔尼菲青霉的染色 ;各种检查方法及其相应的适应症 ? 检查方法 适应症 湿片法 KOH法 皮肤癣菌，念珠菌，花斑癣菌，头癣，暗色真菌，等 KOH刚果红法: 皮肤癣菌，念珠菌，花斑癣菌等 复方KOH法: 角质层较厚的标本如甲癣等 生理盐水法: 生殖道念珠菌 派克黑水KOH法: 糠秕孢子菌 墨汁法: 新生隐球菌 乳酸酚棉兰法: 阴道分泌物、脓等真菌标本 染色法? 沙黄染色法： 糠秕孢子菌 PAS： 深部真菌涂片检查如孢子丝菌等 革兰氏染色： 放线菌，诺卡氏菌，念珠菌等 抗酸染色： 放线菌，诺卡氏菌 瑞氏染色： 荚膜组织胞浆菌，马尔尼菲