真菌讲稿推荐.pptVIP

联合检测 GM+BG联合检测将大大提高深部真菌感染的检测率。 * 血清学检测的不足 1-3-β-D-葡聚糖(BG) 不能区别曲霉与酵母菌感染。 半乳甘露聚糖（GM）不能区分是曲霉菌种 某些药物（如头孢噻肟、厄他培南等））可能致BG假阳性 影响因素多，如无菌操作、去热原处理、溶血…… 对浅部真菌、定植真菌有限。 * 四、真菌的药敏试验 抗真菌的药物种类： 多烯类：二性霉素B、脂质体二性霉素B、制霉菌素。广谱药但副作用大，对土曲菌、毛霉菌、葡萄牙念珠菌效果差。 氟胞密啶：5-FU，对念珠菌、隐球菌有效，余多无效 * 抗真菌药物 吡咯类。咪唑类：酮康唑、咪康唑、益康唑。多为局部用药。三唑类：氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑。是最常用的广谱抗真菌药； 棘白菌素类：卡泊芬净、咪卡芬净 * 抗真菌药物的作用机制 真菌细胞膜的磷脂双层 真菌细胞壁 b-(1,3)-葡聚糖 b-(1,6)-葡聚糖 b-(1,3)-葡聚糖合成酶 麦角固醇 多烯类(例如：两性霉素B) 与固醇结合 棘白菌素类 (例如：卡泊芬净) 抑制酶发挥作用 唑类 (例如：氟康唑) 抑制负责合成的 CYP-450酶 * 卡泊芬净的抗菌谱 黄曲霉菌 烟曲霉菌 土曲霉菌 黑曲霉菌 构巢曲霉菌 杜氏念珠菌 光滑念珠菌 高里念珠菌 乳酒念珠菌 克柔念珠菌 解脂念珠菌 葡萄牙念珠菌 近平滑念珠菌 皱褶念珠菌 热带念珠菌 假热带念珠菌 念珠菌 白色念珠菌 非白色念珠菌 * 真菌药敏试验 液体稀释法 纸片扩散法 E试验 * 真菌药敏之难？ 1.按照NCCLS推荐的稀释法,操作繁琐 2.有些药只能用于某种菌的抗菌活性测定 3.纸片法试验未得到NCCLS 认可 4.E试验价钱太贵 5.药敏孵育时间因菌种而不同 * 真菌药敏之难？ 抗真菌试验的方法的规范统一 结果判断的标准。 针对酵母菌的是NCCLS/CLSI M27-A2方案（适用稀释法）； 针对丝状菌的是M38-A方案，仅此而已。 * 真菌药敏标准 2004年NCCLS/CLSI 发表M44-A方案，为纸片扩散法，仅限氟康唑、伏立康唑，受试菌为念珠菌 综上可见公氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、5-FU等有折点判断标准。 * NCCLS纸片扩散法 培养基： Mueller-Hinton琼脂 补充 2％ Glucose 0.5ug/ml Methylene blue dye PH7.2-7.4 优点：有较好的重复性和稳定性， 操作简便，价廉 缺点：目前只限氟康唑、伏立康唑 * 纸片扩散法 0.5麦氏比浊标准（约为1~5×106CFU/ml）。 菌悬液均匀涂布于药敏板上 步骤同细菌敏感试验操作一致， 35～37℃孵育18～24小时， 对于生长缓慢的菌株如新型隐球菌，菌液需 调至1麦氏单位，孵育48小时， 光滑念珠菌也需孵育48小时读取抑菌环直径。 * 酵母菌纸片扩散法敏感试验 NCCLS M44-A. 氟康唑解释标准和相应的最小抑菌浓度 抑菌环直径 （mm) MIC （ug/ml) 敏感（S) =19 =8 剂量依赖性敏感 （SDD) 15-18 16-32 耐药（R) =14 =64 * 丹麦ROSCO纸片扩散法 1. 克柔念珠菌： 0.5麦氏浊度，生理盐水1：10稀释菌液为5×105CFU/ml 2. 隐球菌属： 1 麦氏浊度 3. 其它酵母菌： 0.5麦氏浊度，生理盐水1：1稀释菌液为2.5×106CFU/ml 将稀释好的菌液涂布在改良的SHADOMY（ PH7.0）培养基上 其它操作同细菌。 * Rosco纸片扩散法各药物折点 粘膜酵母菌感染 氟康唑 ，克霉唑，酮康唑，氟胞嘧啶1ug ，特比奈吩，咪康唑等 敏感：≥20mm 中介 ：12~19mm 耐药：≤11mm 伊曲康唑 敏感：≥15mm 中介：10~14mm 耐药：无抑菌环 氟胞嘧啶10ug 敏感： ≥30mm 用于黑曲霉 中介：23~29mm 耐药：≤22mm 灰黄霉素 敏感：≥10mm 中介：－ 耐药：无抑菌环 * Rosco纸片扩散法各药物折点 系统性酵母菌感染 氟康唑15u