用高效液相色谱法测定饲料中喹烯酮的研究.docVIP

用高效液相色谱法测定饲料中喹烯酮的研究 安徽农业科学,JournalofAnhuiAgri.Sci.2006,34(10):2159,2167责任编辑曹淑华责任校对曹淑华 用高效液相色谱法测定饲料中喹烯酮的研究 张丽芳l2,薛飞群l,2(1.中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所,上海2oo232;2.农业部寄生虫病学重点开放实验室,上海2oo232) 摘要建立了高效液相色谱法测定饲料中喹烯酮含量的方法.饲料用乙腈提取,色谱柱:Diamonsil钻石C18分析柱(250mmx4.6mm. 5m);流动相:乙腈一;6-(45:55),流速为1.0ml/min;在波长380nmT4f~,l.结果表明:喹烯酮的质量在0.04—0.6g范围内与峰面积 呈良好线性关系(~tz=-O.9999);3个不同浓度的样品的回收率分别为89.42%,96.20%,98.83%,RSD分别为1.28%,1.53%,0.78%. 关键词喹烯酮;高效液相色谱法;饲料;喹恶啉.1,4二氧化物 中图分类号$816.2文献标识码A文章编号0517—6611(2006)10—2159—01 DeterminationofQuinoacetoneinFeedwitlIlIiglIPerformanceLiquidChromatography ZHANGLi-fangetal(ShanghaiInstituteofDomesticAnimalParasitology,CAAS,KeyLabofAnimalParasitologyinAculturalMinistry, Shanghai200232) AbstractAhighperformanceliquidchromatographymethodWasdevelopedtodeterminetheamountofquinoacetoneinfeed.Thefeedsample Wasextractedwithacetonitfile.TheseperationofthedrugWasobtainedwithacetonitrile/water(45:55)asmobilephasewithaC18gelcolumn.The detectionwavelengthWas380nm.AgoodlinearresponseWasobtainedforthequinoacetonestandardfrom0.04to0.6gandthecorrelation coefficientWas0.9999.Theaveragerecoveryofquinoactoneinthreedifferentlevelswere89.42%,96.20%and98.83%.respectively. KeywordsQuinoacetone;HPLC;Feed;Quinoxaline.1,4-dioxide 喹烯酮【I1,化学名:3.甲基-2一肉桂酰基一喹恶啉一l,4—二氧 化物(3-Methyl-2-CinnamieaylQuinoxaline—l,4-dioxide),属喹 恶啉一l,4二氧化物类化合物,是由中国农业科学院兰州畜 牧与兽药研究所研制开发的我国一类饲料添加剂药物,对 畜禽有明显的促生长和抗菌作用[21,在禽和猪的饲料中的添 加量分别为50和75mg/kg.目前还未见有关检测饲料中喹 烯酮的报道.该研究采用高效液相色谱法测定饲料中喹烯 酮的含量,操作简便快速,适用于全价配合饲料中喹烯酮的 检测. 1材料与方法 1.1仪器与试剂 (1)Waters2690高效液相色谱仪(美国waters公司生 产),配有2487紫外检测器和Millenium32色谱工作站;超 声波清洗器. (2)喹烯酮(中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所生 产);喹烯酮对照品(自制:氯仿二次精制后再用乙醇精制所 得);乙腈为色谱纯;水为一次蒸馏水经密理博公司去离子 装置过滤. 1.2色谱条件色谱柱:Diamonsil钻石C18分析柱(250 mmx4.6mm);流动相:乙腈一水(45:55),流速为1.0ml/min; 检测波长:380nm;柱温:30oC;进样量:30l. 1.3样品前处理称取饲料2～5g(视喹烯酮含量高低而 定),加入乙腈25ml,超声提取2min,过滤弃去初滤液,取 续滤液经0.45m微孔滤膜过滤. 1.4标准曲线及检测限测定准确称取喹烯酮对照品25 mg于50ml棕色容量瓶中,用乙腈溶解并稀释至刻度,吸取 2～50Inl棕色容量瓶中,用乙腈稀释至刻度,混匀.用自动进 样器分别进样2,5,7,l0,l5,20,30l,按1.2方法进行测定. 1.5精密度试验测定同一饲料样品提取液,重复进样7 次,计算喹烯酮的峰面积的变异系数. 1.