PARP介导氧化应激与糖尿病视网膜病变研究进展.docVIP

PARP介导氧化应激与糖尿病视网膜病变研究进展 　　[摘要] 糖尿病视网膜病变（DR）因其发病率高、病情严重而倍受人们关注，氧化应激能通过各种途径损伤糖尿病的视网膜。聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）是目前国外研究较热的一种酶，并有较多实验证据表明PARP能介导氧化应激并参与糖尿病视网膜疾病的发生。该文就PARP在DR发病中的作用做一综述。 　　[关键词] 聚腺苷二磷酸核糖聚合酶 氧化应激 糖尿病视网膜病变 　　 　　糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)是一种严重的糖尿病并发症，目前在经济发达国家已成为成人致盲的主要原因。高血糖会导致活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)过量产生，使多个组织发生氧化应激，而氧自由基则可以通过糖基化终末产物(AGEs)等多条途径参与DR的损伤过程。最近有研究表明，氧化应激最终有可能是通过激活聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(poly ADP-ribose polymerase，PARP)而发挥作用的[1]，而PARP抑制剂的使用为DR的治疗带来新的前景。 　　 　　1 PARP的结构与功能 　　 　　1.1 PARP的结构 　　聚腺苷二磷酸核糖聚合酶 (poly ADP-ribose polymerase，PARP)是一类存在于多数真核细胞中的催化聚ADP核糖化的核酶。PARP最早于1963年由法国斯特拉斯堡Mandel小组在肝细胞核中发现[2]。它主要存在于细胞核内，少量存在于细胞浆内[3]。目前研究发现，PARP家族至少有：PARP-1、PARP-2、PARP-3、PARP-4/VPARP、Tankyrase-1和-2 6个成员。PARP-1是PARP家族中最早被发现，而且特性了解最清楚的成员。它是由1014个氨基酸残基组成的一条多肽链， 分子量为116 kDa，含有3个功能性结构域：DNA结合结构域(DNA binding domain，DBD，46kDa)，自身修饰域(the automodification domain，AMD，22kDa)和C-端催化域(catalytic domain，54 kDa)。其中DBD含两个锌指结构(Zn-finger)及核定位信号（nuclear localization signal，NLS），这两个锌指结构参与识别DNA缺口，第1个锌指识别DNA单链和双链断裂，它的突变会降低PARP的激活；第2个锌指只参与DNA单链断裂的识别，NLS含有与凋亡相关的DEVD模体。AMD能使ADP与糖基结合，发生PARP自身糖基化，并使PARP形成二聚体。C-末端的催化结构域含有NAD+结合位点，能把NAD+转化为ADP核糖，此序列高 　　度保守[4、5]。 　　 　　1.2 PARP的功能 　　PARP具有维持染色体结构完整，参与DNA复制和转录的功能，在维持基因组稳定和细胞死亡过程中发挥作用。DNA断裂可以激发基因重组，PARP能结合到受损DNA的断端从而减少重组发生，并使受损的DNA避免受核酸外切酶的作用而产生重组中间物。PARP在DNA损伤时被激活，作为DNA损伤的分子感受器识别并结合到DNA的断裂部位，从而保护裸露的DNA末端免遭核酸酶的分解，参与DNA的修复[6]。PARP还能通过协调DNA修复与DNA复制、转录、细胞周期的推进之间的关系，来促进DNA修复[7]。 　　PARP激活促进DNA的修复，但过度的PARP活化将引起细胞能量耗竭而死亡。Lin等研究发现，在PARP的催化下，每转化一个ADP核糖，需要消耗2个ATP才能从尼克酰胺再合成一分子的NAD+，尼克酰胺转化成尼克酰胺单核苷酸(NMN)需要消耗5-磷酸-α-D-核糖-1-焦磷酸和一个ATP，NMN再转化为NAD+又需要另一个ATP。这样，PARP的过度活化可以导致无谓的NAD+转化和ATP消耗。NAD+的消耗也能通过降低糖酵解和氧化磷酸化的方式减少ATP[8]，最终导致细胞死亡。 　　 　　2 PARP与细胞氧化损伤 　　 　　2.1氧化应激损伤引起线粒体DNA（mtDNA）损伤的机制 　　 　　2.1.1自由基介导的mtDNA损伤 　　自由基主要来源于线粒体氧化磷酸化过程，是线粒体正常代谢的副产物，由线粒体电子传递链产生，但是过量的自由基产生便会损伤线粒体。自由基可以广泛攻击体内生物大分子。由于mtDNA缺乏组蛋白，与氧化磷酸化场所(线粒体内膜)相距甚近，复制快速且无校读功能以及缺乏有效的DNA修复机制，所以mtDNA较易受自由基攻击、氧化损伤而引起突变，其突变率是核DNA的10倍。 　　自由基通过攻击mtDNA的碱基和糖基，最终可导致mtDNA的点突变、缺失和插入突变，其中以片段缺失多见。氮氧