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丙型肝炎的病原学诊断 中南大学湘雅医院感染病科 谭德明 HCV-RNA定量检测方法及检测范围 HCV 核心抗原检测 是一种新的检测手段,研究始于上世纪九十年代中期, 2001年商品化,在临床研究应用 主要检测方法有荧光酶免疫法(fluorescent enzyme immunoassay; FEIA ), ELISA和放射免疫测定法(immuno-radiometric assay; IRMA) HCV核心抗原检测与HCV RNA测定有高度的一致性,可能也是一个反映HCV复制的血清学指标 丙肝实验室病原学诊断要点(一) 丙肝抗体检测用于筛查, 但确诊需要HCV-RNA的定性检测 HCV-RNA的定性诊断敏感度高于HCV-RNA定量诊断, 适合筛查后的确诊 HCV-RNA定量检测有助于评估疗效和预测治疗预后 丙肝基因型检测统一按照simmonds方法,HCV基因型将决定丙肝个体化治疗方案 丙肝实验室病原学诊断要点(二) HCV核心抗原是一种新的HCV现症感染诊断的标志 HCV核心抗原阳性与HCV RNA相关性较好，也是反映HCV病毒血症的指标， HCV核心抗原检测既可用于献血员筛选,以便发现HCV感染的窗口期,提高血源的安全性,也能用于临床诊断和抗病毒治疗效果的检测与预测. 其方法简单，影响因素少,实验结果重复性好,与HCV RNA 检测相比,更使用于我国国情。 HCV核心抗原与HCV RNA联合应用可能有助于提高临床对活动性丙型肝炎的诊断率. 健康人群 乙肝患者 丙肝患者 （n=20） （n=20） （n=149） 国产（湖南景达）HCV核心抗原试剂检测结果 HCV核心抗原和HCVRNA结果比较 54.36 81/149 HCV核心抗原，HCVRNA（＋）和HCV核心抗原，HCVRNA（—）/检测总标本数 38/149 HCV核心抗原（—）/HCVRNA（＋） 30/149 HCV核心抗原（＋）/HCVRNA（—） 24.83 37/149 HCV核心抗原（—）/HCVRNA（—） 29.53 44/149 HCV核心抗原（＋）/HCVRNA（＋） 符合率(%) 阳性标本数 分组 χ2=0.94, P0.05 丙型肝炎的病原学检测 ? 血清免疫学标志物: 抗HCV(IgG, IgM)： ELISA ； RIBA HCV 核心抗原： ELISA ? 血清分子生物学标志物: HCV-RNA: Quality test ：nested RT-PCR； TMA(transcription-mediated amplification) Quantity test ：real time PCR: bDNA （branch DNA hybridization)， Genotyping * * ● 丙型肝炎是由丙型肝炎病毒引起的以慢性病毒 性肝炎为主要表现的常见传染病 ● 主要通过输血传播 ● 病原学诊断主要依靠抗HCV、HCV RNA 和HCV 核心抗原的检测 C E1 E2/NS1 NS2 NS3 NS4a NS4b NS5a NS5b 血清丙型肝炎病毒抗体的检测 ELISA1 RIBA1 C100 C100 5-1-1 ELISA2 RIBA2 C22-3 C33C C100 C33C C100 5-1-1 ELISA3 RIBA3 C22-3 C33C C33C C100 C100 5-1-1 NS5 NS5 三代抗HCV检测试剂特点的比较 试剂 敏感性※ 低感染人群 高感染人群 ELISA-1 70 ? 80% 30 ? 50% 70 ? 85% ELISA-2 92 ? 95% 50 ? 61% 88 ? 95% ELISA-3 97 %