高中生物必考实验.docVIP

高中生物实验总结 实验一观察DNA和RNA在细胞中的分布 实验原理：DNA遇甲基绿呈绿色，RNA可被吡罗红染成红色 实验步骤 步骤 器材与试剂 作用与原理 （1）制片 ①将牙签刮下的口腔上皮细胞置于载玻片上0.9%的NaCl溶液滴 ②载玻片烘干 1??? 0.9%的NaCl溶液防止细胞破裂，2 维持细胞形态。 3??? 烘干使细胞固定在载玻片上 （2）水解 8%HCl中30℃保温5分钟 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离。 （3）冲洗 用蒸馏水缓流冲洗10分钟 ? （4）染色 2滴吡罗红甲基绿染色5分钟 甲基绿使DNA染上绿色 吡罗红使RNA染上红色 （5）观察 显微镜下观察 ? 实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色. 分布：真核生物的DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。 【注意事项】??1.材料的选择???① 选用的实验材料既要容易获得，又要便于观察；???② 常用的观察材料由人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞(为避免原有颜色的干扰，不可使用紫色表皮细胞)???2.取材要点???① 取口腔上皮细胞之前，应先漱口，以避免装片中出现太多的杂质；? ② 取洋葱表皮细胞时，尽量避免材料上带有叶肉组织细胞。???3.冲洗载玻片时水的流速要尽量慢，切忌直接用水龙头冲洗。???4.安全要点???① 用酒精灯烘烤载玻片时，不要只集中于材料处，而应将载玻片在火焰上来回移动，使载玻片均匀受热，以免破裂；???② 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中，最好先自然冷却1分钟。???5.换用高倍镜观察材料时，只能用细准焦螺旋进行调焦，切不可动粗准焦螺旋。 酒精灯烘干载玻片,可迅速杀死细胞.防止细胞死亡时溶酶体对核酸的破坏 实验原理：可溶性糖中的还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖），与斐林试剂发生作用，可以生成砖红色的沉淀。脂肪可以被苏丹III染成橘黄色。蛋白质与双缩脲试剂发生作用，可以产生紫色反应。 1、还原糖的检测 还原性糖：有还原性基团——游离醛基或酮基的糖；如葡萄糖、果糖、麦芽糖、 （1）材料的选取：还原糖含量高，白色或近于白色，如苹果，梨，白萝卜。 （2）试剂：斐林试剂（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），现配现用。 （3）步骤：取样液2mL于试管中→加入刚配的斐林试剂1mL（斐林试剂甲液和乙液等量混合均匀后再加入）→水浴加热2min左右→观察颜色变化（浅蓝色→棕色→砖红色） 2、脂肪的检测 （1）材料的选取：含脂肪量越高的组织越好，如花生的子叶。 （2）步骤：制作切片（切片越薄越好）将最薄的花生切片放在载玻片中央 ?????????????? ↓ ?染色（滴苏丹Ⅲ染液2～3滴切片上→2～3min后吸去染液→滴体积分数50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精） ????????????????? ↓ 制作装片（滴1～2滴清水于材料切片上→盖上盖玻片） ↓ 镜检鉴定（显微镜对光→低倍镜观察→高倍镜观察染成橘黄色的脂肪颗粒） 转动细准焦螺旋时，若花生切片的细胞总有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？? 切片的厚薄不均匀。? 脂肪鉴定中乙醇作用？?洗去浮色 3、蛋白质的检测 （1）试剂：双缩脲试剂（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液） （2）步骤：试管中加样液2mL→加双缩脲试剂A液1mL，摇匀→加双缩尿试剂B液4滴，摇匀→观察颜色变化(紫色) 实验三 一、显微镜的使用： 显微镜使用注意事项： 1、成像特点：放大倒立的虚像。 2、放大倍数计算：物镜的放大倍数×目镜的放大倍数。放大倍数指的是物体的长或宽，不是面积，更不是体积。视野中的细胞若是排成一行，则视野中观察到的细胞数目与放大倍数成反比；若是散乱排列，则视野中观察到的细胞数目与放大倍数的平方成反比。 3、显微镜使用时物像移动方向：物像的移动方向与装片的移动方向相反。即物像在视野何方，则装片即向该方向移动。 4、显微镜使用时异物的判断：目镜、物镜或装片上，通常通过移动玻片（是否在玻片上），转动转换器（是否在物镜上）来判断，剩下在目镜上。 5、 低倍镜下成像特点：物像小、细胞数目多、视野亮。 高倍镜下成像特点：物像大、细胞数目少、视野暗。 6、物镜和目镜的判断方法：物镜有螺纹，目镜无螺纹。 7、放大倍数的判断方法： 目镜：镜头长，放大倍数小；镜头短，放大倍数大。 物镜：镜头长，放大倍数大；镜头短，放大倍数小。 物镜与装片之间的距离：距离近放大倍数大，距离远放大倍数小。 8、高倍镜的使用时注意【操作要规范：先低后高，先粗后细，先降后升。】 ①低倍镜使用过程中，下降镜筒时