REACH法规第四卷译稿-35.docVIP

B.35. 第二代毒副作用检测 1. 测定方法 1.1. 引言 见描述部份B. 1.2. 定义 见描述部份B. 1.3. 参考物质 无。 1.4. 测定方法原则 测定物质按梯度剂量提供给雄性和雌性的一些个体。父母亲(P)代的雄性应该在生长期间或至少一个完整的精子发生周期内服药：（大约小鼠56天，大鼠70天）以便得出测定物质引起的精子发生的任何不利作用。 父母亲的(P)代的雌性应该在至少二个完整的发情周期服药以便得出测定物质引起的发情的任何不利作用。然后动物交配。测定物质在交配期间和其后仅对雌性而言的怀孕期间和看护持续期间对两性提供。在断奶期物质的提供持续到F1代子孙的生长至成年，交配并繁殖F2代，直到F2代断奶。通过吸入提供的方法将需要修正。 1.5. 质量标准 无。 1.6. 测定方法的描述 准备 在测定之前，健康的动物被随机分配到被处理和对照组的团体。父母亲的(P)动物饲养在实验房里并且在测定之前喂养条件持续至少五天。据推荐的测定物质是在饮食或饮用水中被提供。其他的提供路径也是可接受的。所有的动物应该在整个实验期间用相同的方法服药。如果媒介物或其他添加剂被用于促进服药，它们应该被确认不含毒效。服药应该在每星期七天的基础上进行。 动物样品：物种选择 大鼠或小鼠是首选的物种。 健康的P动物，不受早先实验步骤的影响，应被采用。低产率的应变不应被采用。测定动物应根据物种，应变，性别，重量和/或 年龄表示其特点。 对于生产率进行合适的评估，雄性和雌性应该均被研究。所有的测定和对照组动物应该在服药前断奶。 数目和性别 每个处理和对照组团体应该包含动物足够的数目需要大约20怀孕的雌性在或者在此期间附近。目的是要产生足够的怀孕和子孙以便确保有意义的对影响生产率，怀孕和母亲的行为和哺乳,生长和F1代子孙从怀孕到成熟的发展 , 和它们的子孙(F2)的发展到断奶的物质潜力的评估。 测定条件 食物和水应该被提供并添加性激素。在分娩将近时，怀孕的雌性应该是单独运到笼子里关起来或运到孕妇笼内或许可能被提供筑巢材料。 剂量水平 至少三个测试组和一个对照组应被采用。如果媒介物被用于提供测定物质,对照组应收到使用过的最大体积的媒介物。如果测定物质引起饮食吸入或利用的减少，然后使用成对喂养的对照组团体可能被认为是必须的。理想地, 除非测定物质的物理/化学特性或生物学作用被限制，最高剂量水平应当引起毒性而不至于引起父母亲的(P)动物样品的必死命运。中间剂量(s)应该引起归属于测定物质的最小毒效，和低剂量应该不引起在父母或子孙上的任何观察得出的不利作用。当以填喂或胶囊提供给每只动物样品的药量的时候应该以个别动物样品的体重为基础并且每周调整。对怀孕期间的雌性，药量应以怀孕0天或6天的体重为基础，如果需要。 极限测定 对低毒性物质的情况，如果至少1000毫克/公斤的剂量水平给出和生殖表现没有冲突的证据，对其他剂量水平研究可能被认为是必须的。如果高剂量水平的初步研究，具明母性毒性的明确证据，表明无生产率方面的不利作用，其他剂量水平的研究不可能被认为是必须的。 测定的实施 实验时间表 当它们在大约五到九个星期大时，父母亲的(P)雄性的每日服药开始，在它们已经断奶而适应新环境至少五天后。在小鼠中，服药是在交配期前持续10个星期之久 (小鼠，八个星期)。雄性应该被杀并且在交配时期结束时被检查或，二选一地，雄性可能为了另一窝的可能繁殖的测定饮食而被留住或应该被杀或在实验结束前的一些时间内被调查。 对于父母亲的(P)雌性定量给料应该在环境适应至少五天之后开始并且在交配前持续至少二个星期。P雌性的服药应持续三周的交配，怀孕和决定于Fl子孙的断奶期。应当考虑修正基于关于测定物质的其他可获信息的定量给料时间表，像是新陈代谢或生物体内积累的感应。 F1代动物样品的服药始于断奶并结束于宰杀它们时。 交配步骤 1:1( 一雄性到一雌性) 或 1:2( 一雄性对二雌性)的交配可能被用于繁殖毒性研究。 基于 1:1 的交配，一雌性应该与同一雄性一起直到怀孕或三个星期后。每天早上雌性应该为精液或阴道闭塞的出现而被检查。怀孕0天被定义为一个阴道闭塞或精液被发现的日子。考虑精子形成F1代子孙直到它们成为小鼠至少11个周，大鼠13周才交配。对正在交配的F1代子孙, 一个雄性和一个雌性任意地从相同剂量组的另一个窝的幼畜的交叉交配中选出以产出F2代。不被选作交配的F1代雄性和雌性在断奶后被杀。 交配失败的配对应该被评估为以决定明显的不育因素。这可能与如提供附加的机会以便同其他被证明的公畜或母畜交配，生殖器官显微检查，和发情周期或精子发生检查的的步骤有关。 窝的大小 在生殖研究周期间服药的动物被允许正常产仔而且养育它们的后代到不需要产仔的标准化断奶阶段。 在标准化被完成的处，下列各项步骤被提出。在出生后第一