植物组织培养第六次课.pptVIP

第四章 植物胚胎培养及离体授粉 植物胚胎培养是指对植物的胚、子房、胚珠和胚乳进行离体培养，使其发育成完整植株的技术。 应用：育种工作 研究胚胎发育过程中的生理代谢变化以及有关影响胚发育的内、外因素等问题。 离体授粉（试管受精）应用于克服远缘杂交中花粉与柱头间的不亲和性。 第一节 植物胚培养 一、胚培养的类型 1、成熟胚培养 在比较简单的培养基上萌发生长、培养技术要求不严。 2、幼胚培养 较成熟胚难培养，要求的技术和条件也较高 幼胚培养时以两种方式生长： 继续进行正常的胚胎发育，维持胚性生长 萌发成幼苗，不维持胚性生长，称为“早熟萌发” 二、胚培养的应用 （一）克服远缘杂交的不亲和性 （二）打破种子休眠，缩短育种周期 （三）提高种子萌发率。 三、幼胚培养 （一）材料的选择和灭菌 （二）幼胚的分离与培养 1、幼胚的分离 2、幼胚的培养 就营养需要来说，可把胚胎发育过程分为两个时期：异养期、自养期 在有些情况下，幼胚很难培养成功，在这种情况下，利用胚乳看护培养，胚由仅仅包围它的胚乳组织提供营养，可显著提高幼胚的成活率。 四、影响胚培养的因素 碳水化合物：调节培养基的渗透压；作为碳源和能源；防止幼胚早熟萌发。 胚的生长受胚乳滋养，因此，加入一些天然的胚乳和种子提取物，对离体胚的生长有促进作用。 胚柄 在幼胚培养中，胚柄的存在会显著刺激胚的进一步发育，GA3能有效的取代胚柄的作用。 第二节 植物胚乳培养 胚乳培养：将胚乳组织从母体上分离出来，通过离体培养，使其发育成完整植株的技术。 一、胚乳培养的方法 （一）胚乳外植体的制备 （二）胚乳愈伤组织的诱导及形态建成 1、愈伤组织诱导 2、形态建成：器官发生和胚胎发生两种途径来实现 （三）三倍体后代的特征 1、形态特征 产生无子果实，多倍体植株比原植株具有粗壮、叶片肥大、叶色浓、花大而重瓣、果实大胆结实率低的特征。 2、胚乳再生植株的倍性 染色体倍性混乱 二、影响胚乳培养的因素 胚对胚乳培养的影响，与胚乳的生理状态和年龄有关： 旺盛生长的胚乳，无胚存在，能形成愈伤组织 成熟胚乳，必须有胚存在 胚对胚乳的增殖作用，有人认为是某种“胚性因子”在起作用，这种“胚性因子”可能是GA3。 三、胚乳培养的应用 1、获得三倍体幼苗和植株 2、得到染色体组合的胚乳植株，为染色体工程探索一条有用途径 3、为研究淀粉、蛋白质、脂肪的生物合成及其代谢提供了一个很好的系统 第三节 植物胚珠和子房培养 一、胚珠培养 是指将胚珠从母株分离出来，在人工控制的条件下，进行离体培养，使其发育形成幼苗的技术。 分为：受精胚珠培养 未受精胚珠培养 （一）胚珠培养的意义 1、使杂种尽早培养，防止杂种胚早期败育，获得杂种植株 2、受精前胚珠培养及未受精的胎座或子房培养，可作为试管受精的基础。 3、未受精的胚珠培养用于单倍体育种 （二）胚珠培养方法 1、材料的选择和灭菌 2、培养基对胚珠培养的影响 3、对带有胎座或子房的胚珠进行培养时，所需培养基简单，而且受精后的胚珠也容易发育成种子。 4、球形胚后的胚珠，较易获得种子 二、子房培养 是指将子房从母体分离下来，置于培养基上，使其进一步发育成幼苗的技术 培养意义:使未受精胚囊中的单倍性细胞诱导成单倍体植株 获得杂种植株 为试管受精提供一项基础技术 据培养的子房是否授粉：授粉子房培养 未授粉子房培养 3、培养子房的发育 性细胞→单倍体植株 体细胞→二倍体植株 第四节 植物离体授粉 受精前的障碍：花粉在柱头上不能萌发 花粉生长受抑而不能进入胚珠 花粉管在花柱中破裂 离体授粉是指将未授粉的胚珠或子房从母体分离下来进行无菌培养，并以一定的方式授以无菌花粉，使其在试管内实现受精的技术，又称为离体受精或试管受精 据无菌花粉授于离体雌蕊的位置，可将离体授粉分为： 离体柱头授粉 离体子房授粉 离体胚珠授粉 （一）离体柱头授粉 是指通过雌蕊的离体培养，使无菌花粉授于柱头上，得到含有可育种子和果实的技术。 （二）离体子房培养 通过人工方法将花粉直接引入子房，使花粉在子房腔内萌发，并进行正常受精，最后获得具有生活力的种子。 子房授粉：活体子房授粉 离体子房授粉 1、活体子房授粉 是指授粉的子房并不离体，仍然在活体植株上，对其 用花粉悬浮液进行授粉，使活体子房发育并形成成熟种子的过程。