体内实验探讨stard10对hdl代谢的影响-老年医学（心血管内科）专业论文.docx

解放军医学院博士学位论文3．实验结果(钙)(二)StarDl0对小鼠胆固醇逆向转运的影响，f、㈣)1．实验材料(％)2．实验方法(钾)3．实验结果(移)(三)StarDl0对小鼠肝脏脂代谢相关蛋白的影响(观)1．实验材料(钇)2．实验方法(弱)3．实验结果(钌)(四)StarDl0对小鼠主动脉斑块的影响(％)1．实验材料(％)2．实验方法()3．实验结果(铭)结论(记)讨论(∞)参考文献()．缸第二部分社区人群血脂水平与主动脉僵硬度的随访研究(加)一．实验材料(加)二．实验方法(加D三．实验结果(∞)结论(刀)讨{仑(为)参考文献(趴)文献综述(踮)博士在读期间发表论文(％)致谢(卯)万方数据解放军医学院博士学位论文英文缩略词表万方数据解放军医学院博士学位论文starDl0在HDL代谢中的作用及机制探讨中文摘要背景血脂代谢紊乱严重影响中国人健康。高低密度脂蛋白胆固醇血症(LDL．c)是动脉粥样硬化性疾病的主要危险因素。此外，低高密度脂蛋白胆固醇(HDL．c)在中国人群中也十分常见。已经证实，低HDL—C血症是动脉粥样硬化性疾病发生、发展的独立危险因素。先前我们通过miI矾A芯片筛查发现microRNA．638(miR一638)与HDL—c水平相关，人群中miR一638的表达在低HDL．c人群较HDL．c正常人群表达高。通过生物信息学靶点预测(h婶：／／、w州ta唱etscall．o唱／)，发现miR-638有潜在与血脂代谢有关的靶基因steroidogenicacuteregulatoryprotein-relatedlipidtransferdomain10(StarD10)。目的动物体内实验探讨StarDl0与HDL代谢的关系；探讨StarDl0对动脉粥样硬化斑块的影响；探讨StarDl0对胆固醇逆向转运的影响；探讨社区人群血脂水平与动脉僵硬度关系的随访研究。方法第一部分：一、①构建腺病毒介导starDlo基因过表达载体；②构建腺病毒介导starDlo沉默载体；③starDl0过表达小鼠模型的建立：模式动物随机分组，尾静脉注射腺病毒starDlo过表达载体、StarDlO沉默载体、腺病毒空载体及PBs缓冲液(每周2次×l周，每周1次×3周，共计4周)。二，①模式动物血浆TG、TC、HDL．C、LDL—C浓度测定；②starDlo对小鼠胆固醇逆向转运的影响：通过测定小鼠血清、肝脏及粪便中3H一胆固醇占经腹腔注射3H一胆固醇总量的百分比，评估活体胆固醇逆向转运；③收集小鼠肝脏标本，观察starDlo对肝脏脂代谢相关蛋白表达的影响：提取蛋白质，W色stem-blot检测相关蛋白水平的变化；④收集小鼠主动脉标本，观察starDlO基因过表达载体对动脉粥样硬化程度与性质的影响：选取代表性主动脉窦截面，H．E染色，定量测定StarDl0表达栽体干预前后动脉粥样硬化斑块的面积；油红O染色测量脂质沉积情况；免疫组化染色观察斑块稳定性指标：CD68+巨噬细胞分布。第二部分：本课题选取北京地区苹果园社区人群，初次调查时间为2007年9月至’万方数据解放军医学院博士学位论文2009年1月，共计1680受试者参加，平均年龄为61．30士1 1．4。2013年2月至9月完成第一次随访调查，共计1499例受试者参加随访(随访率89．2％)，平均随访时间为4．8年，其中死亡人数52人。单变量分析：基线血脂水平及随访cf-PwV或c卜PWV相关性。多元线性回归分析：基线血脂水平及随访cf．PWV或c卜PwV相关性(因变量为：cf_PWV或cr-PwV；自变量为：年龄、性别、是否吸烟、是否有高血压病、糖尿病、sBP、DBP、BMI、腰臀围比、Tc、TG、HDL．c、LDL．c、eGFR、空腹血糖及餐后2h血糖)。结果第一部分：一、①经复核腺病毒包装StaLrDl0过表达载体滴度约为l×10ⅢPFu恤Jo②经复核腺病毒包装starDlo沉默载体滴度约为l×1010PFu／m l。③在28周的高脂高胆固醇喂养及starDl0干预后，StarDlO过表达组小鼠与基线组、PBs对照组、腺病毒对照组相比较，体重及肝脏重量未表现出明显统计学差异，P0．05；starDlo沉默组小鼠与基线、PBs、腺病毒对照组相比较，体重及肝脏重量未表现出统计学差异，Po．05。PBs对照组、腺病毒对照组、starDlo过表达组及starDlo沉默组小鼠肝脏StarD l 0蛋白在肝脏组织的表达量分别为(0．8693士O．02)、(o．8344士O．03)、(1．2055士0．04)、(o．5215士0．04)。starDlo过表达组starDl0蛋白表达明显高于PBS组、腺病毒对照组，P0．01，st曲lo沉默组starDlo蛋白表达明显低于PBs组、腺病毒对照组，P