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中国河北地区汉族女性苗勒氏管发育异常与tbx6基因突变的相关性研究-妇产科学专业论文
河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组=J的指导下,由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。河:Ik医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文,第一署名为单位河北医科大学,试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河.-IL医科大学所有。否则,承担相应法律责任。广∥■彳》-、研究生躲副威。聊签章勃二级学院每酸,-灞1夕。胪t、移溺箩’河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特别加以标注和致谢等内容外,文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写,文责自负。研究生签名:痧j破秒新酶砀\一3J/吖沙伊年_7月均日万方数据目录中文摘要1英文摘要5英文缩写10研究论文中国河北地区汉族女性苗勒氏管发育异常与TBX6基因突变的相关性研究前言丹U舌11l1材料与方法11结果22附图24附表27讨论32结论39参考文献40综述先天性苗勒氏管发育异常遗传因素的研究进展44致谢66个人简历67万方数据中文摘要中国河北地区汉族女性苗勒氏管发育异常与TBX6基因突变的相关性研究摘要目的:苗勒氏管发育异常(MiillerianDuctsAnomalies,MDA)是一类罕见的先天性女性生殖道缺失或严重畸形的疾病,主要是由于在胚胎时期因各种原因,将来发育成为子宫、宫颈、输卵管和阴道上部的苗勒氏管单侧或双侧发育停滞、发育不良、融合不全或吸收异常,从而导致了一系列女性生殖器官缺失或畸形,如先天性无子宫无阴道(Mayer-Rokitansky.Ktister-Hausersyndrome,MRKH综合征)、双子宫双宫颈、单角子宫、纵隔子宫、阴道纵隔、阴道闭锁等。苗勒氏管发育异常可导致患者闭经、性生活困难、不良妊娠结局等,极度影响了患者的身心健康。迄今为止先天性苗勒氏管发育异常的发病原因尚不完全明确,多数学者认为是多基因多因素联合作用所致。目前已发现若干候选基因与苗勒氏管发育异常有关。候选基因之~TBX6基因,属于T-box基因家族,对胚胎发育和器官形成的正常调控起着重要作用。本研究旨在通过筛查中国河北地区汉族女性苗勒氏管发育异常是否存在TBX6基因的突变来探讨两者的相关性。方法:1临床资料收集:病例组:2013年3月至2014年11月期间,于河北医科大学第二医院就诊或随访的,经妇科检查及辅助检查中B超、宫腔镜、腹腔镜或子宫输卵管造影术至少两项后,由两名妇科主任医师诊断明确的97例苗勒氏管发育异常患者,对照组为110例同时期因输卵管妊娠入院手术治疗但排除生殖系统发育异常的女性,至少有一次正常妊娠,无其他任何基础疾病及各种系统发育畸形,无生殖系统发育异常家族史。病例组及对照组成员均来自中国河北省地区且分布相似,均为汉族,其核型均正常(46,XX),第二性征均发育正常,均排除性腺发育异常及先天性。肾上腺皮质增生症。病例组包括MRKH综合征患者32例、始基子宫合并无阴道患者3例、双子宫双宫颈合并完全性阴道纵隔患者1例、双子宫双/单宫颈不合并阴道纵隔患者4例、纵隔子宫(完全或不完全)伴阴道纵万方数据中文摘要隔患者12例,纵隔子宫(完全或不完全)不伴阴道纵隔患者11例,双角子宫患者4例,单角子宫合并/不合并残角子宫患者16例,弓形子宫患者2例,阴道斜隔综合征(表现为双子宫双宫颈,阴道斜隔完全或不完全地闭锁一侧阴道,斜隔同侧的肾脏缺如,obliquevaginalseptumsyndrome,OVSS)患者6例,阴道上段闭锁合并/不合并宫颈发育不良伴有功能内膜子宫患者4例,阴道横隔患者2例。获知情同意后抽取病例组及对照组成员的外周静脉血编号冻存。2提取全基因组DNA、扩增及测序:提取病例组及对照组外周静脉血中全基因组DNA,通过聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)对TBX6基因的9个外显子及外显子.内含子边界分别进行扩增,通过琼脂糖凝胶电泳与DNAMarker比对确定为目的片段后进行纯化,采用Sanger测序法进行DNA序列检测。3测序结果分析统计:以美国国立生物技术信息中心(National CenterforBiotechnologyInformation,NCBI)数据库中正常TBX6基因序列为标准,应用MutationSurveyor软件进行序列分析比对,应用软件SPSS13.0进行统计分析,对检测到的错义突变应用电脑软件SIFT(SortingIntolerantfromTolerant)及PolyPhen2(PolymorphismPhenotypingv2)进行突变位点功能预测。计量资料以中位数表示,频数资料比较采
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