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第八章 微生物遗传变异与菌种保藏;本章内容;第一节 遗传的物质基础;实验材料:
实验方法: ;实验材料: 肺炎双球菌;;SⅢ〖热死〗 ;大量R菌落;;
;
;
;第二节 基因突变及修复;一 基因突变;(一) 突变类型;1 碱基变化与遗传信息的改变;2 表型变化;(1)营养缺陷型(auxotroph);完全培养基;(2)抗药性突变型(resistant mutant);▲ 在某一条件下具有致死效应,在另一条件下没有致死效应。
▲ 合成关键性酶的基因发生了突变。
▲ 如温度敏感突变ts(42℃致死,25℃~30℃存活)。
▲ 用影印平板进行分离筛选。 ;细胞形态突变
菌落形态突变
颜色突变
噬菌斑形态突变;
;二 DNA损伤及修复(自学);光复活作用(Photoreactivation);Photoreactivation;正常可见光下光诱导系统的修复。;第三节 基因重组;基因重组
§ 把两个不同性状个体内的遗传基因转移到一起,经遗传
物质重新组合后,形成新遗传型个体的方式。
§ 基因重组——分子水平的杂交
§ 一般杂交——细胞水平;一 原核微生物的基因重组;(一)转化(transformation);
;
;;
;在细菌的感受态出现时,具有从周围环境吸收DNA分子而不被DNA酶破坏的生理特性。处于感受态的细胞,吸收DNA的能力有时可比一般细胞大1000倍。;;(二) 转导(transduction); 普遍转导(Generalized Transduction)
噬菌体可以转导供体染色体的任何部分到受体细胞中。
局限转导(Specialized Transduction)
噬菌体总是携带同样的片段到受体细胞中。;结果10-5频率出现野生型菌株。(基本培养基) ;
;Specialized Transduction;Specialized Transduction;(三)接合(conjugation);
;Davis(1950)
U型管试验
两个菌株不能直接接触,只能是培养液和营养物质(包括DNA分子)可以通过。 ;1. F+与F-杂交;滚环式复制, σ式 ;;2. Hfr×F-杂交;质粒和染色体共有插入序列和转座因子。这些转座因子之间的同源重组导致质粒的整合。;Hfr×F-杂交结果仍是Hfr细胞和F-细胞。;Hfr和F+的联系和区别 ;3. F ’ 转导;§ 给体的部分染色体基因
随F’一起转入受体细胞。
基因不需整合就可表达。
§ 利用F ’ 因子形成部分二
倍体叫做性导 sexduction。;注意区别F+菌、 Hfr 菌、 F ’ 菌的不同!;转化、转导、接合三者的根本区别在于DNA转移的方式不同;二 真核微生物的基因重组;(一) 有性生殖;子囊孢子形成过程;粗糙脉胞霉(面包霉)的生活史;粗糙脉胞霉减数分裂;;(二)准性生殖(parasexual reproduction);1 准性生殖;2 准性生殖的意义;3 准性生殖的过程;异核体
同时具有二种或二种以上不同基因型核在同一细胞质中,这种现象又叫异核现象。
同核体
同一菌丝中只有一种核。
;体细胞交换和单倍体化
体细胞交换:
杂合二倍体细胞中有极少数细胞核在进行有丝分裂
的过程中,能发生体细胞染色体间的交换、分离
(单倍体化)而产生具有新性状的单倍体杂合子。
单倍体化:
在一系列有丝分裂过程中一再发生的个别染色体减
半,直至最后形成单倍体的过程。 ;(三)酵母菌的接合型遗传;启动子;第四节 微生物育种;一 诱变育种;1、概念;2 诱变剂;化学诱变剂;?插入剂 (intercalating agents):
如:溴化乙锭、吖啶橙等一些三环分子。
机制:在形态上类似于碱基对的扁平分子。它们插入DNA分子的碱基对之间,使其分开,导致DNA在复制过程中的滑动,引起移码突变。 ;与胞嘧啶反应,加上羟基(-OH),对胞嘧啶加以修饰。修饰后的胞嘧啶类似胸腺嘧啶T。;碱基类似物——5-溴尿嘧啶(5BU);B DNA分子吸收稀有状态的5BU
G — 5BU A — T
;图示;3 诱变程序;4 诱变的主要环节;(1)诱变剂的选择:
1)了解诱变剂的性质、作用机理和使用方法。
2)处理方式
§单一因子处理:先后使用。
§
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