甲肝M型抗体作业指导书.docVIP

分析原理 μ-捕捉法：反应时间：18分钟. 第一步孵育：自动吸取10 μ l经过通用稀释液作1:400稀释的样本，用抗-Fdγ试剂遮蔽用钌复合物标记的单克隆Anti-HAV中的IgG进行前处理。 第二步孵育：加入生物素标记的单克隆人IgM特异抗体、HAV抗原、链霉亲和素包被的磁珠后，样本中的Anti-HAV-IgM与HAV抗原和钌标记的Anti-HAV抗体形成双抗体夹心复合物，通过链霉亲和素与生物素的特异结合使复合物结合在固相载体上。 反应混和液吸到测量池中，微粒通过磁铁吸附到电极上，未结合的物质被清洗液（PROCELL）洗去，电极加电压后产生化学发光，通过光电倍增管进行定。 检测结果由Elecsys软件自动测出，病人样本电化学检测信号与预先用抗- HAV-IgM标定的标本Cutoff值的信号比较得出。 标本要求 标本只有按照下列方法收集、检测才能被接受。 血清标本采集用标准样本试管或含分离胶的试管。 血浆：肝素(Li-,Na-)、K3－EDTA或枸橼酸钠抗凝.（标准: 血清值的批内回收率 90-110%）。标本在2－8℃可稳定7天，-20℃可稳定6个月。标本可冻融5次11。关于使用含分离胶试管的血清的稳定性的资料,要注意试管制造商提供的资料。冻溶样本和含沉淀的标本使用前需离心。 不要加热灭活标本。标本和质控品禁用叠氮钠作稳定剂。确保病人样本、定标物、质控物在测试前温度达到20-25℃. 因为可能挥发的影响,放在分析仪上的样本、定标物、质控物应在两小时内测试完。 试剂、校准品、质控品和其他所需材料 采用罗氏原装配套试剂。 试剂： Elecsys Anti-HAV IgM试剂盒，货号 100人份 M：链霉亲和素包被的微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml： 链霉亲和素包被的微粒：0.72mg/ml，生物素结合能力：470ng生物素/mg粒子。含防腐剂。 R1：Ru(bpy)32+标记的Anti-HAV-Ab（灰盖），1瓶，10ml：钌复合物标记的单克隆抗体(鼠)：0.15μg/ml,抗-人-Fdγ抗体(绵羊)： 0.04mg/ml，HEPES缓冲液50mmol/l，pH7.2，含防腐剂。 R2：生物素化的抗-人-IgM 抗体；H（黑盖），1瓶，10ml：生物素化的抗-人-IgM 单克隆抗体(鼠)0.4μg/l；HAV抗原（细胞培养）25U/ml；HEPES缓冲液50mmol/l，pH7.2，含防腐剂。 校准品：· Cal 1 阴性定标液1（白盖），2瓶，0.67ml/瓶，人血清, 抗HAV-IgM 阴性,含防腐剂。 Cal 2 阳性定标液2（黑盖），2瓶，0.67ml/瓶, 抗HAV-IgM（人）浓度约5U/ml在人血清中, 含防腐剂。 质控品：Elecsys 抗HAV IgM质控品1和2，每个8×0.67ml，货其他所需材料： · Elecsys 通用稀释液,2×18ml，货或 Elecsys 通用稀释液,2×40ml，货· Elecsys 定标液小瓶，2×56带盖空瓶，货号· 常用实验室设备 · Elecsys 2010或MODULAR ANALYTICS E170 Elecsys2010分析仪附件: · Elecsys 系统缓冲液（ProCell）,6×380ml，货· Elecsys 测量池清洗液（CleanCell），6×380ml，货· Elecsys 添加剂液（SysWash），1×500ml，货· Elecsys 2010反应杯（Assay Cup），60×60， 货· Elecsys 2010吸样头（Assay Tip），30×120，货MODULAR ANALYSIS E170分析仪附件: · Elecsys 系统缓冲液（ProCell M）,1×2L,货· Elecsys 测量池清洗液（CleanCell M）,1×2L,货 Elecsys 系统缓冲液/测量池清洗液预热杯（PC/CC-Cup）,50个,货· Elecsys 清洗液（ProbeWash M），12×70ml，用于最终清洗和试剂转换清洗，货· Elecsys 反应杯/吸样头盒(AssayCups/AssayTips Combimagazine M),48×84，货· Elecsys 废物盒(wasteliner)，货· Elecsys 系统清洗液支架(SysClean Adapter M)，货号03