粘红酵母12-脂肪酸脱氢酶基因的克隆和表达.PDFVIP

下载本文档

3
0
约3.93万字
约 6页
2018-05-10 发布于江苏
举报
版权申诉

粘红酵母12-脂肪酸脱氢酶基因的克隆和表达.PDF

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

粘红酵母12-脂肪酸脱氢酶基因的克隆和表达

2015-06-25 DOI: 10.3724/SP.J.1145.2014.11024 / Chin J Appl Environ Biol 2015 21 ( 3 ) : 421-426 应用与环境生物学报，粘红酵母∆12-脂肪酸脱氢酶基因的克隆和表达* 杨晓霞何仕武魏云林林连兵季秀玲张琦** 昆明理工大学生命科学与技术学院昆明 650500 摘要 Δ12-脂肪酸脱氢酶一般特异性催化在油酸的Δ12位引入双键转变成亚油酸. 为了从粘红酵母YM25079 中克隆全长 Δ12-脂肪酸脱氢酶基因序列，参考已知的Δ12-脂肪酸脱氢酶基因序列设计基因特异性引物，通过PCR扩增获得到全长为 1 353 bp的cDNA序列，序列分析结果表明该序列具有一个编码450个氨基酸的完整开放阅读框，所编码蛋白质 3 12 50.9 × 10 - 3 的大小为 . 与报道的Δ 脂肪酸脱氢酶一样，推测的氨基酸序列具有膜整合脂肪酸脱氢酶特异性的个组氨酸保守区，表明该序列为一个新的编码Δ12-脂肪酸脱氢酶的基因. 为了验证其功能，把开放阅读框序列亚克隆到表达载体pYES3/CT，构建重组表达载体pYRGD12 ，并转化到酿酒酵母的缺陷型菌株INVScl进行表达. 脂肪酸气相色谱 GC Δ12- （）分析表明，该序列所编码的蛋白质具有脂肪酸脱氢酶活性，能将油酸转化为亚油酸，亚油酸的含量占酵母 4.31% PCR 12- 5 1 18 总脂肪酸的 . 以上结果表明，所获得序列是新的Δ 脂肪酸脱氢酶基因. 图表参 Δ12- 关键词粘红酵母；脂肪酸脱氢酶；亚油酸；克隆和表达 CLC Q78 : Q936 Cloning and heterologous expression of a Δ12-desaturase gene from Rhodotorula glutinis * ** YANG Xiaoxia, HE Shiwu, WEI Yunlin, LIN Lianbing, JI Xiuling ZHANG Qi Faculty of Life Science and Technology, Kunming University of Science and Technology, Kunming 650500, China Abstract Δ12- fatty acid desaturase generally introduces a new double bond specifically at Δ12 position