抗生素生产工艺8.pptVIP

第三节 发酵培养基的设计 1、单位培养基能产生最大量的目的产物； 2、能使目的产物的合成速率最大； 3、副产物合成的量最少； 4、质量稳定、价格低廉、易于长期获得； 5、尽量不影响后处理。 教学重、难点 重点：掌握发酵培养基组成要素及培养基设计和优化。 难点：发酵培养基的设计及优化。 ※二、发酵培养基的组成要素 P59 碳源 氮源 无机盐和微量元素 前体及其他生长因子 功能： 构成菌体细胞物质（氨基酸、嘌呤、嘧啶、蛋白质、DNA和RNA）和含氮代谢物。 氮源种类 (三) 无机盐及微量元素 p61 功能： 生理活性物质的组成或生理活性作用的调节物（调节细胞酶活性），保持培养液中电解质浓度和渗透压。 （四）前体及其他因子p62 ※1）前体： 指在抗生素生物合成中，菌体利用它以构成抗生素分子中的一部分而其自身结构又没有显著改变的物质，但是产物的产量却因其加入而有较大的提高。 前体发现： 2）其他生长因子 3）产物合成促进剂 促进剂：细胞生长非必需，但加入后却能提高产量的添加剂，称为促进剂。 ※三、发酵培养基的设计及优化p63 发酵基础培养基成分选择的原则 发酵培养基的优化 培养基设计时应注意的问题 发酵基础培养基确定方法 1、做好调查研究工作； 2、对生产菌种要了解； 3、根据生产和科学研究的需要选择培养基； 4、根据经济效益选择培养基原料。 发酵基础培养基成分选择的原则 （1）C 源 葡萄糖：分解代谢物会组遏或抑制某些产物合成所需的酶系的形成或酶的活性； 诱导酶制剂生产：易利用的碳源（葡萄糖、果糖）不利于产酶；难利用碳源（淀粉、糊精）对产酶有利。 （2）N 源 微生物利用N源的能力随菌种、菌龄而已。多数能分泌胞外蛋白酶的菌株在有机氮源上可良好生长。 同一微生物处于不同生长阶段对氮源的利用能力不同。生长早期易利用铵盐、氨基氮；生长中期利用蛋白质的能力强。 (3)合适的C、N比 （1）N源：过多，菌体生长旺盛，pH偏高， 不利于代谢物积累， 过少，菌体繁殖量少，影响产量。 （2）C源：过多，易造成较低的pH， 过少，易引起菌体的衰老和自溶。 一般工业发酵培养基的C/N＝0.2%～2.0% 发酵培养基的优化 1 正交试验设计的概念及原理 1.1 正交试验设计的基本概念 正交试验设计是利用正交表来安排与分析多因素试验的一种设计方法。它是由试验因素的全部水平组合中，挑选部分有代表性的水平组合进行试验的，通过对这部分试验结果的分析了解全面试验的情况，找出最优的水平组合。 举 例： 要考察增稠剂用量、pH值和杀菌温度对豆奶稳定性的影响。每个因素设置3个水平进行试验 。 全面试验：可以分析各因素的效应 ，交互作用，也可选出最优水平组合。但全面试验包含的水平组合数较多，工作量大 ，在有些情况下无法完成 。 正交试验设计的基本特点： 用部分试验来代替全面试验，通过对部分试验结果的分析，了解全面试验的情况。 它不可能像全面试验那样对各因素效应、交互作用一一分析。 虽然正交试验设计有上述不足，但它能通过部分试验找到最优水平组合 ，因而很受实际工作者青睐。 1.2 正交试验设计的基本原理 正交设计就是从选优区全面试验点（水平组合）中挑选出有代表性的部分试验点（水平组合）来进行试验。 1.3 正交表及其基本性质 1.3.1等水平正交表的记号及含义 （1）任一列中，各水平都出现，且出现的次数相等 例：L8(27)中不同数字只有1和2，它们各出现4次；L9(34)中不同数字有1、2和3，它们各出现3次 。 （2）任两列之间各种不同水平的所有可能组合都出现，且对出现的次数相等 例：L8(27)中(1, 1), (1, 2), (2, 1), (2, 2)各出现两次；L9(34) 中 (1, 1), (1, 2), (1, 3), (2, 1), (2, 2), (2, 3), (3, 1), (3, 2), (3, 3)各出现1次。 （1）任一列的各水平出现的次数相等 （2）任两列间所有水平组合出现次数相等，使得任一因素各水平的试验条件相同。 这就保证了在每列因素各水平的效果中，最大限度地排除了其他因素的干扰。从而可以综合比较该因素不同水平对试验指标的影响情况。 对于多因素试验，正交试验设计是简单常用的一种试验设计方法，其设计基本程序如图所示。正交试验设计的基本程序包括试验方案设计及试验结果分析两部分。 例：确定赖氨酸产生菌FB31发酵培养基成分乙酸钠、氯化胺、酵母膏、无机盐适宜浓度对发酵培养基的影响。 ① 明确目的，确定指标。本例的目的是通过试验，