生物转化DL-Ala分离D-Ala的可行性.docVIP

生物转化DL-Ala分离D-Ala的可行性 DL-Ala的现状 D-Ala为非天然型氨基酸，但由于它的生理活性不断地发现以及本身独有的特性，使得他越来越广泛的得以应用。 （一）药物的应用 D-Ala是生产维生素VB6的原料，具有镇痛作用；也可以制成输液注射单剂合剂；近期发现的D-Ala新的生理活性，可以增加D-Ala新的应用。 （二）食品添加剂 D-Ala具有丙氨酸的一些共性,即在食品添加剂方面的应用,主要供增味剂和调味料用,增加化学调味料的调味效果,改善人工甜味剂的味感,改善有机酸的酸味。而且D-Ala是合成二肽甜味剂阿力甜的原料，阿力甜甜味品质好,味道纯正,热量低、甜度高，符合人们目前对低热食品的追求。 （三）化妆品 D-Ala有抑菌作用,而且是自然保湿因子(ＮＭＦ)的主要成分,可用于保持水分化妆品的方向。 生物转化优势及条件 D-Ala为非天然型氨基酸，随着它的的生理活性和越来越广泛的应用，它的制取已经引起了很大的兴趣。一般氨基酸的制取方法有三种：水解提取法,微生物发酵法，化学合成法。（一）水解提取法一般都得到Ｌ-氨基酸， D-Ala不适用的制取。（二）化学合成法一般反应机制复杂，工艺过程长；不是需要纯手性试剂或贵金属络合物作催化剂，就是所得到的产物皆为ＤＬ-Ala，必须进行光学拆分，才可以得到Ｄ-Ala。（三）微生物发酵法一般产物浓度低,生产周期长,设备投资大,有副反应,分离较复杂且产物Ｄ-Ala的光学纯度比较低。 从目前已掌握的情况看，寻找出一种生产过程简化，成本低，且产物纯度高的方法是人们梦寐以求的。其中在微生物领域，存在若干个菌群能够特异性的拆分DL-Ala外消旋物，其全细胞液发酵产物经过脱色、过滤、重结晶等能够得到化学纯度和光学纯度较高的D-Ala产物。这种微生物方法的原理是特定条件下培养微生物，能够产生对L-Ala具有强氧化能力的氨基酸氧化酶，而D-Ala完全不参加反应。，这样以DL-Ala为底物，随着反应的进行，D-Ala产物浓度增高，进而进行产物分离，可以成为生物转化DL-Ala生产D-Ala法。 生物转化DL-Ala生产D-Ala法的优势在于生产过程简单，反映条件温和，生产成本低，污染小、分离效果好，产物纯度高等优点。 从已有的资料分析，此工艺方法需注意或具有以下几点： 1.在以DL-Ala为底物情况下，特异性地对L-Ala具有强氧化能力，而D-Ala完全不参加反应，作为目标物提取出来。 2. 作为底物的DL-Ala，其中的D-Ala和L-Ala比例不受限制，但当以D-Ala含量高的底物为优选。 3. 在生物转化DL-Ala生产D-Ala的微生物选择上，在包括假丝酵母、其他丝状真菌，包括细菌的大肠杆菌属、变形杆菌属、绿脓杆菌属等G_细菌；优选丝状真菌的曲霉属的黑曲霉或假丝酵母菌；作为病毒传染性的细菌类用于生产时因具有传染性，生产条件要求高，成本增大。 4.次生产过程为微生物全细胞发酵液流加底物DL-Ala转化过程，因此需要有适于此实验工作需要的设备与场所。（附：微生物实验室与设备） 前景 从当前的一些资料、行业现状、产品需求等，可以得出以下几点：１.D-Ala的应用将出现两个增长点(1) D-Ala生理新活性的出现将引起第一个增长点（2）阿力甜的特点将引起消费者和厂商的亲睐，引发第二个增长点２.各个厂商、科研院所对于D-Ala生产工艺方法研究的热情从一个侧面反映出D-Ala在人们心目中的地位和前景。 假使一种新的工艺方法能够生产出低成本、高质量的D-Ala商品，无疑将是一场新的革命，将在竞争激烈的商业竞争中占据一个制高点；利用微生物特异性转化外消旋物DL-Ala中的L-Ala而集聚D-Ala的方法，提供了一条可以探索的途径；这条途径的成功将使前景一片光明。 （酶工程法与微生物发酵法转化DL-Ala分离D-Ala的反应本质相同，皆属酶转化反应，但前者为单酶或多酶的高密度转化，而后者为多酶低密度转化；酶工程技术工艺简单，产物浓度高，转化率及生产效率较高，副产物少；固定化酶或细胞可进行连续操作，节省能源和劳务，并可长期反复使用。此外，用酶法协同化学方法可能会得到比微生物特异性转化外消旋物DL-Ala中的L-Ala而集聚D-Ala的方法更好的结果，首先设备简单，其次不消耗L-Ala，产物为L-Ala和D-Ala，更具优势。） （附件） 微生物实验室及设备 一、选址： 1. 实验室应选择在清洁安静的场所，远离生活区，锅炉房与交通要道； 2. 实验室应选择在光线充足，通风良好的场所，要与生产加工车间有一定距离； 3. 实验室应选择在方便选样与检验，距离车间较近的工作场所． 二、结构和布局： 根据实验实际需要，主要包括以下三大部分：细菌实验室、理化实验室、办公室． 1. 办公室 2. 理化分析实验