分子生物学[宝典].docVIP

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分子生物学[宝典]

第一章:绪论 掌握分子生物学狭义和广义的概念 狭义:分子生物学是研究核酸、蛋白质等生物大分子的结构与功能,并冲分子水平上阐述核酸与蛋白质、蛋白质与蛋白质之间相互作用的关系的学科。 广义:它是一门在分子水平上研究生命现象、阐明生命本质的学科。 熟悉分子生物学的研究内容、分子生物学的发展历程。(看书本自己熟悉就好) 第二章:基因和染色体 第一节:DNA结构 掌握DNA一级结构的概念、连接方式; 一级结构:DNA分子中核苷酸的排列顺序,两个核苷酸之间通过3ˊ, 5ˊ-磷酸二酯键连接形成多聚体。 掌握DNA二级结构的内容(双螺旋要点,稳定因素); 特点:(1)DNA分子由两条反向平行的多聚脱氧核苷酸链构成双螺旋结构。存在大沟与小沟。 (2)磷酸和脱氧核糖位于外侧,嘌呤碱和嘧啶碱层叠于螺旋内侧,相邻碱基之间的垂直距离为0.34nm。 (3)双螺旋的直径为2nm,顺轴方向每隔0.34nm有一个核苷酸,两个核苷酸之间的夹角为36°,沿中心轴每旋转一周约有10个核苷酸。 稳定因素:(1)碱基堆积力(2)氢键(3)相反电荷的稳定作用 熟悉DNA二级结构的多样性; A、B和C型右手螺旋DNA 与Z-型左手螺旋DNA ; 了解三链DNA、四股螺旋DNA和超螺旋DNA DNA的拓扑学性质表示参数:(1)连接数L(Linking number) (2)缠绕数T(Twisting number) 第二节:变性、复性和分子杂交 1. 掌握核酸变性、复性、分子杂交、增色效应、减色效应、Tm的概念 DNA变性:DNA分子中有序的双螺旋解离成无序单链的过程 DNA复性:变性DNA在适当条件下,两条彼此分开的链又可以重新地合成双螺旋结构的过程 分子杂交:有互补序列的两条核酸单链在一定条件下,按碱基配对原则形成双链的过程 增色效应:变性后DNA溶液的紫外吸收作用增强的效应 Tm:核酸加热变性过程中,紫外吸收值达到最大值的50%时的温度 2. 熟悉影响核酸变性的因素、变性核酸的特点 特点:(1)溶液黏度降低(2溶液旋光性发生改变(3)增色效应 3. 了解核酸复性的动力学 4. 掌握Southern blotting、Northern blotting的目的,了解其过程 目的:Southern blotting—鉴定检测DNA的杂交方法 Northern blotting—对mRNA进行定性和定量分析 第三节:基因的概念 1. 熟悉基因概念的发展历程 孟德尔提出遗传因子概念,约翰逊提出基因,基因型,表型的概念 2. 掌握基因、顺反子、断裂基因、外显子、内含子、重叠基因、假基因、跳跃基因、持家基因、奢侈基因的概念 基因gene:具有遗传效应的DNA片段 顺反子Cistron:编码一个蛋白质的全部组成所需信息的最短片段 断裂基因split gene:基因的编码序列在DNA上不是连续的,而是被不编码的序列隔开。 外显子exon:基因中编码的序列,与mRNA的序列相对应 内含子intron:基因中不编码的序列 重叠基因overlapping gene:两个或两个以上的基因共有一段DNA 序列。 假基因pseudogene:与有功能的基因在核苷酸顺序组成上非常相似,却不具有正常基因的功能 跳跃基因jumping gene:一段可以从原位上单独复制或断裂下来,环化后插入另一位点,并对其后的基因起调控作用的DNA序列。 持家基因house keeping gene:维持细胞基本生命活动所必须的基因 奢侈基因luxury gene:指导合成组织特异性蛋白的基因 第四节:基因簇和重复序列 1.掌握基因家族、基因簇的概念 基因家族gene family:真核生物的基因组中有许多来源相同、结构相似、功能相关的基因,这样的一组基因称为一个基因家族 基因簇gene cluster:一个基因家族的成员紧密连锁成簇状排列在某一染色体上,形成一个基因簇。 2.掌握重复序列的分类 分类:(1)单拷贝序列(unique sequence)(2)中度重复序列(moderately repetitive sequence)(3)高度重复序列(highly repetitive sequence) 第五节:染色体和核小体 1.掌握核小体的概念 核小体nucleosome:组成真核细胞染色体的基本结构单位 2.了解真核生物染色体的组装 第六节:基因组 1. 掌握基因组、大C值、小c值、C值矛盾的概念 基因组genome:单倍体细胞中的全套染色体 大c值maximum c value:单倍体基因组总DNA含量 小C值minimum c value:编码基因信息的总DNA含量 C值矛盾c value paradox:人细胞的曾哥基因组中实际上只有很少一分部的DNA序列用以编码蛋白质的现象 2. 比较

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