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食品一般成分的分析(Ⅳ) ?不同的蛋白质其氨基酸构成比例及方式不同,故各种不同的蛋白质其含氮量也不同,蛋白质的量与氮含量的关系可用蛋白质系数表示; ?一般蛋白质含氮为16%,所以1份氮素相当于6.25份蛋白质。此数值(6.25)称为蛋白质系数,用F表示。 ?不同种类食品的蛋白质系数有所不同: 如玉米,荞麦,青豆,鸡蛋等为6.25; 花生为5.46; 大米为5.95; 大豆及其制品为5.71; 小麦粉为5.70; 牛乳及其制品为6.38 。 ?一类是利用蛋白质的共性,即含氮量、肽键和折射率等; ?另一类是利用蛋白质中特定的氨基酸残基、酸性和碱性基因以及芳香基团等测定蛋白质含量。 3. 脂溶性维生素的性质及样品处理方法 (1) 溶解性:脂溶性维生素不溶于水,易溶于脂肪、乙醇、丙酮、氯仿、乙醚、苯等有机溶剂。 (2) 耐酸碱性:维生素A、D对酸不稳定, 对碱稳定,维生素E对碱不稳定,但在抗氧化剂存在下或惰性气体保护下,也能经受碱的煮沸。 (3) 耐热性、抗氧化性 不易被氧化 好,能经受煮沸 VD 在空气中能慢慢被氧化(光、热、碱促进其氧化) 好,能经受煮沸 VE 易被氧化(光、热促进其氧化) 好,能经受煮沸 VA 抗氧化性 耐热性 维生素 (4) 样品处理方法 皂化法处理 样 品 水洗去除类 脂 物 有机溶剂提取脂溶性维生素(不皂化) 浓缩溶于适当溶剂 测定 4. 水溶性维生素的性质及样品处理方法 (1)水溶性维生素B1、B2和C,广泛存在于动植物组织中,易溶于水,而不溶于苯、乙醚、氯仿等大多数有机溶剂。 (2)在酸性介质中很稳定,既使加热也不破坏; (3)在碱性介质中不稳定,易于分解,持别在碱性条件下加热,可大部或全部破坏。 (4)易受空气、光、热、酶、金属离子等的影响:维生素B2对光,特别是紫外线敏感,易被光线破坏;维生素C对氧、铜离子敏感,易被氧化。 游离态维生素 维生素B1/B2 盐酸 酶 解 木瓜蛋白酶 水 解 或淀粉酶 提 取 活性人造沸石 硅镁吸附剂 纯 化 维生素C通常采用草酸、草酸—醋酸、偏磷酸—醋酸溶液直接提取。在一定浓度的酸性介质中,可以消除某些还原性杂质对维生素C的破坏作用。草酸价廉,使用方便,对维生素C有很好的稳定作用。 样品处理方法 5. 维生素的测定方法 微生物法:基于某种微生物生长需要特定的维生素,方法特异性强、灵敏度高、不需要特殊仪器,样品不需经特殊处理,但只能测定水溶性维生素。 化学法:比色法、滴定法 仪器法:色谱法、荧光法、酶法、免疫法等。特别是HPLC可用于大多数维生素的测定,并且在某些条件下可同时分析几种维生素,但分析费用较高。 应根据不同的食品基质和条件选择不同的分析方法。 §7. 2 维生素A的测定 维生素A存在于动物性脂肪中,主要来源于肝脏、鱼干油、蛋类、乳类等动物性食品中。植物性食品中不合VA,但在深色果蔬中含有胡萝卜素,它在人体内可转变为VA,故称为VA原。 维生素A的测定方法 三氯化锑比色法 紫外分光光度法 高效液相色谱法 §7.2.1 三氯化锑比色法 1.原 理 在氯仿溶液中,VA与三氯化锑可生成蓝色可溶性络合物,在 620 nm 波长处有最大吸收峰,其吸光度与VA的含量在一定的范围内成正比,故可比色测定。 2. 试剂 无水Na2SO4、乙酸酐:吸水 三氯化锑-三氯甲烷:反应试剂 乙醇、KOH:皂化反应 酚酞:用于鉴别洗涤液中有无碱 乙醚:抽提 三氯甲烷:溶剂 3. 操作过程(P113) (1)预处理:皂化、提取、洗涤、浓缩 (2)绘制标准曲线:用VA标准液,用CHCl3调满度。在移入光路前,迅速加入三氯化锑,6秒内测定。 (3)样品测定:用样品溶液代替标准液溶液。 3.适用范围及特点 本法适用于维生素A含量较高的各种样品(高于5~10 μg/g ),对低含量样品,因受其他脂溶性物质的干扰,不易比色测定。 该法的主要缺点是生成的蓝色络合物的稳定性差。比色测定必须在6秒种内完成,否则蓝色会迅速消退,将造成极大误差。 4. 说明 ? 维生素A见光易分解,整个实验应在暗处进行,防止阳光照射,或采用棕色玻璃避光。 ? 萃取时,不要用力过猛,避免发生乳化。 ? 氯仿中必须无水,因三氯化锑遇水会出现沉淀,干扰比色测定。 ? 三氯化锑腐蚀性强,不能沾在手上,三氯化锑遇水生成白色沉淀,因此用过的仪器要先用稀盐酸浸泡后再清洗。 §7.3 胡萝卜素的测定 胡萝卜素是一种广泛存在于有色蔬菜和水果中的天然色素,有多种异构体和衍生物,总称为类胡萝卜素,其中在分子结构中含有 β一紫罗宁残基的类胡萝卜素,在人体内可
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