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分子与化学生态学 绪 论 分子生态学产生的背景、历史和现状 分子生态学的出现 生命科学的发展 生物学 生态学 数学生态学 化学生态学 分子生态学 1992 Molecular Ecology 分子生态学的定义 Molecular Ecology的定义: 分子生态学(molecular ecology)是在分子水平上对生态问题的研究。1992年Burke等提出,分子生态学是应用分子生物学方法为生态学和种群生物学各领域提供革新的见解 。 分子生态学的研究范畴 分子适应。包括遗传分化和生理适用以及环境对基因表达的影响。 例:分子生态学与保护生物学 居群或谱系的单一性以及它与其它分类群的差异 为了“保护未来最大生物多样性”而维持进化的可能性 分子生态学与行为生态学 基因差异导致行为差异 等位基因在染色体上的竞争关系 迁移和迁飞行为 社群行为和等级关系 利它行为的基因调控 分子生态学的技术 分子生态学研究热点 生态适应性研究 胁迫蛋白和热休克蛋白 酶和基因的多型性研究 生物诱导与基因表达 重组生物带来的危险 产生有害生物 危害生物群落 改变生态系统过程 直接危害人类 参考文献 Parker, PG, AA Snow, MD Schug, GC Booton, PA.Fuerst. 1998. What molecules can tell us about populations: choosing and using a molecular marker. Ecology 79: 361-82. Carvalho GR, (ed.), 1998, Advances in molecular ecology, IOS Press, Amsterdam, NATO Science Series A: Life Science (Vol. 306) 第一章 遗传标记的基础 第一节 基因组 1. 概念 历史:最早由遗传因子这一概念发展而来,基因1909,基因组 (1920) 指生物体细胞内所有基因的总和,真核生物单倍体基因的总合 2. 基因组的类型 第二节 遗传标记 1. 遗传标记的特征 在亲本间具有多态性(差异性),具有可以识别性 在后代能重复出现(可遗传性) ? 2. 遗传标记的类型 形态标记,可见标记 细胞学标记 蛋白质标记 DNA标记 2.2.细胞学标记 优缺点 细胞学标记克服了形态标记易受环境影响的缺点,但是这种材料的产生需要花费大量的人力物力进行培养选择。 2.2.1染色体的线性分化 1)?????? 长度 2)?????? 着丝粒:表现在臂比 3)?????? 端粒 4)?????? 核仁组成区 5)?????? 染色粒 6)?????? 常染色质与异染色质 2.2.2 核型分析的时期 1)?????? 有丝分裂中期进行 2)?????? 减数分裂的粗线期 2.2.3 带型分析 1)多线染色体的带纹 2)分带(人工分带) a)????? G带 b)?????? Q带 荧光染料 c)?????? R带(反带) d)?????? C带 异染色质带 人类染色体的历史: 1956 瑞典 2n=46 1960 丹佛 人染色体的命名,分群 1971 巴黎,带型系统 1977《人类细胞遗传命名国际体制》 1981《人类细胞遗传学高分辨率显带命名国际体制》 2.3 蛋白质标记 蛋白质分子分析简单快捷,是有用且可靠的遗传标记,用作标记的蛋白质通常可以分为酶蛋白质和非酶蛋白。 引起蛋白质多态性的原因? 同功酶标记 Western Blotting 同工酶与等位酶 电泳分析,带型差异 Western Blotting Western Blotting 是将蛋白质转移并固定在化学合成膜的支撑物上,然后以特定的亲和反应、免疫反应或结合反应以及显色系统分析此印迹。这种以高强力形成印迹的方法被称为Western Blotting技术。 印迹法需要较好的蛋白质凝胶电泳技术,使蛋白质达到好的分离效果,而且要注意胶的质量,要使蛋白质容易转移到固相支持物上。另外蛋白质在电泳过程中获得的条带被保留在膜上,在随后的保温阶段不丢失和扩散。免疫印迹分析需要很小体积的试剂,较短的时间过程,一般操作很容易,宜于应用和理论上的研究。 免疫印迹的实验包括5个步骤: 1.固定:蛋白质进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)并从胶上转移到硝酸纤维素膜上。 2.封闭:保持膜上没有特殊抗体结合的场所,使场所处于饱和状态,用以保护特异性抗体结合到膜上,并与蛋白质反应。 3.初级抗体(第一抗体)是特异性的。 4.第二抗体或配体试剂对于初级抗体是特异性结合并作为指示物 5.被适当保温后的酶标记蛋白质区带
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