动物实验的常用技术2.pptVIP

141 一、手术准备 (一)常用器械准备 (二)消毒 1．手术器械的消毒 (1)煮沸法：适用于金属、玻璃器械、缝合材料或橡皮手套等的灭菌。煮沸前将器械上的油脂擦干净，一般煮沸20～30 min即可。水中加入2%碳酸氢钠或0.25%氢氧化钠溶液可提高水的沸点，并能防止金属器械生锈。 (2)高压蒸汽法：适用于布类、敷料、手术衣帽及器械的灭菌。通常用104.0 kPa（15 Ibf/in2）压力，温度121℃，维持15~30 min。橡胶制品高压灭菌时采用69.33 kPa (10 Ibf/in2）（115℃）维持10 min。 （Ibf/in2＝磅力每平方寸，1 kPa＝0.145 Ibf/in2）。 (3)化学药品消毒法： ①LJ-强化戊二醛 √ ②70%酒精浸泡30min。 √ ③常用0.1%苯扎溴铵(新洁尔灭)1000ml，加入亚硝酸钠5g，浸泡30min可杀灭一般细菌，18h可杀灭细菌芽孢。 √ ④0.1%氯己定(洗必泰)浸泡30 min，作用比新洁尔灭强。 ⑤由甲醛、碳酸钠、碳酸，配成的“三合液”，用于器械消毒，一般浸泡30 min。 二、手术基本操作 切开 分离 止血 缝合 第十节 检测指标的选择和 常用生理指标的检查 一、检测指标的选择 药效学实验选用的指标应能准确无误地反映受试药物对机体的影响，判定复制的动物模型是否成功，也需选用一些指标客观评定。选择检测指标须注意以下几点要求。 (四)狗、猫的采血方法 1.前肢内侧皮下头静脉和后肢外侧小隐静脉采血 固定, 剪被毛, 消毒, 在静脉向心端处用橡皮带绑紧, 使血管充盈, 用连有6~7号针头的注射器刺入静脉, 放松对静脉近端的压迫, 以适当的速度抽血, 一般一次可抽血10~20ml。 狗、猫采血 2.大血管采血 从颈静脉、颈动脉、股静脉、股动脉或腹主动脉等大血管采血时, 先麻醉动物,仰卧位固定, 消毒, 切开皮肤并分离暴露血管, 放置一牵引线(静脉血管在近心端, 动脉血管为远心端)。提起牵引线, 手持注射器逆血流走向穿刺采血。也可剪断血管直接取血。这属于开放性放血。 狗、猫采血 狗、猫采血 非开放性采血法是确定穿刺点, 剪去被毛, 消毒, 用注射器直接刺入血管。 3.心脏采血 同大鼠、小鼠采血。 4.耳缘静脉取血 同家兔耳缘静脉取血。 狗、猫采血 狗、猫采血 二、尿液的采集 1.代谢笼采集 代谢笼可把动物的粪和尿分开, 便于单独收集尿液. 适用于中小型动物。 2.导尿采集 3.膀胱穿刺法 麻醉,固定,剪毛,消毒,用连接长针头的注射器直接刺入膀胱采集尿液。穿刺点在耻骨前腹部正中线上。 尿液的采集 尿液的采集 4. 压迫膀胱强制排尿 固定, 按压骶骨两侧的腰背部或轻轻压迫膀胱的体表部位, 促使其排尿。 5. 提尾采集 采集少量尿液, 适用于啮齿类动物，尤其小鼠这种反射明显。 尿液的采集 三、胸腔积液的采集 主要采用胸腔穿刺术 四、腹腔积液的采集 主要采用腹腔穿刺术 五、消化液的采集 1.胃液采集 通过食物的颜色、气味等的刺激,促使胃液分泌增加,再插入导管采集. 2.胆汁及胰液采集 需手术采集。 六、脑脊液的采集 1．犬、兔脑脊液的采集 2．大鼠脑脊液的采集 七、精液的采集 ?对于小型动物, 一般在雌雄交配后24h内, 收集雌性动物阴道内的透明阴道栓; 对于中型以上动物常用假阴道诱精法。有的也可采用穿刺附睾法采集精液。 1. 人工阴道采集家兔精液 2. 附睾内采集小鼠精液 八、骨髓的采集 大动物骨髓的采集通常用活体穿刺法, 多采集胸骨、肋骨、股骨的骨髓。 采集大鼠、小鼠骨髓,脱臼处死,剥离出股骨,用注射器吸取一定量的Hanks液, 冲出股骨中骨髓液备用。 第八节 实验动物血液标本的处理 在动物实验中常需检测血液学、生物化学、免疫学等指标，故必须掌握血液标本的处理和保存技术。一般血液标本分为全血、血浆和血清。 全血是加入适当的抗凝剂使血液不凝固而含有血细胞成分的标本，常用于血红蛋白测定、细胞培养、全血分析和制备血中各种细胞。 血浆为全血中加入适当的抗凝剂、去除细胞成分后剩余部分的标本，比血清分离快且量多。血浆多用于血液凝固机制等方面的检查。 血清是血液离体后，由于血液中一系列凝血因子被激活使血液凝固后，析出的澄清黄色透明的液体。血清是血液生化分析最常用的标本。 一、常用抗凝剂和保存剂 应用物理或化学的方法，除去或抑制血液中某些凝血因子，阻止血液凝固，称为抗凝(anticoagulation)。当以全