第七章细菌和病毒.pptVIP

建立纯系的方法——纯培养 影印培养法 影印培养法 Hfr菌株的形成及其基因转移 Hfr菌株的形成及其基因转移 重组作图a 重组体的基因型是lac＋ade＋b 重组体的基因型是lac－ade＋ 大肠杆菌染色体图 性导过程示意图 8．5 噬菌体及其重组简介一、病毒的种类 根据宿主划分： 微生物病毒 植物病毒 无脊椎动物病毒 脊椎动物病毒 亚病毒 类病毒 拟病毒 朊病毒 细菌病毒一般称为噬菌体（phage） h+r-×h-r+培养所产生的四种噬菌斑 为什么？ 因为在 Hfr高频重组菌株中所有的F因子都整合到了细菌染色体上，由于质粒的转移能力很强，所以很多细菌的染色体都跟着转移。而在正常F+菌株到F-菌株过程中在一个菌落很多细菌种只有极个别的F+菌株转变成了Hfr高频重组菌。所以重组频率低，只有1*10-7 ? ?四、中断杂交及重组做图 Hfr菌株型azir tonr gal+lac+strs × F-菌株azistons gal-lac-strr? azir叠氮化物抗性， tonr对T1噬菌体抗性， gal+对葡萄糖可利用（原养型）， lac+对乳糖可利用 strs对链霉素敏感 即除strs 外Hfr 菌株上的基因都为野生型，而strs 在另外的质粒上，不参与转导。? F-菌株泽恰好相反。 1．中断杂交作图机理 ? 当将Hfr菌株与F-菌株共培养时 Hfr菌株中的基因就会顺序向F- 菌株转移。 在共培养过程中每隔一分钟(取出一部分）就用搅拌器搅拌一次 目的：将接合管打断 然后将所获得菌液在含链霉素的完全培养基上培养 目的：杀死所有Hfr菌株 存活的全部为F-菌株及转入部分基因的细胞。 分别影印到下述四种培养基培养液上进行培养。 含叠氮化物 含T1噬菌体 含葡萄糖， 含乳糖培养基 先转移基因就会先发生重组表达出来，后转移基因后出现。从在F-菌株中出现顺序可推断基因的排列顺序，相互间出现时间的间隔，可以推断它们之间的遗传距离。(见图版8.4) F+ F- Tonr azi- Gal Lac ↓ Tonr azi- 实际试验操作结果： 在F-菌株中： 四种培养基： 含叠氨化物 含T4噬菌体 含蔗糖 含乳糖 9分钟时 11分钟 18分钟 25分钟 出现菌落 出现菌落 出现菌落 出现菌落 最后还形成了部分能与其它F-细菌高频重组的细菌， 说明F因子中的致育基因等相关基因最后转入。因为只有有F因子相关基因时才能侵染转化其他菌株。 时间（分钟） 转移的基因 〈9 - 9 azir 11 azir tonr 18 azir tonr lac+ 24 azir tonr lac+ gal+ T=0：杂交开始； T=8分钟内，无重组菌落出现； T=9分钟，有少量azir菌落，但仍为tons。 T=11分钟时，开始出现tonr菌落； T=18分钟时，出现lac+菌落； T=24分钟时，出现gal+菌落。 1、 中断杂交实验结果 A time map of the genes studied in the experiment 由此可以画出上述基因的连锁图（分析参考前图） ______________________________________ 由于F因子在细菌染色体上有多个相对应的可配对区域（而F因子上只有一个配对区），并且F因子与之结合上时方向也有所不同，这样含同样F因子的同一种细菌由于