分子生物学课件八 DNA AND PROTEIN.pptVIP

DNA AND PROTEIN 真理、美与双螺旋 2. 28 ，50周年纪念，25岁Watson,34岁Crick，雄鹰酒馆的吹牛变成100%的现实。 生命中统治分子：35亿年前就统治世界 人体有10万亿个细胞，每细胞1条链（展开1.82米），10万亿个链首尾相连，横跨太阳系。 从蛔虫到人，从细菌到大象，都是DNA产物 真理、美与双螺旋 改变对自己、对文化、对战胜自然力量的想法。让科学家着迷，给艺术家灵感，向社会发出挑战。像地震波一样，带来希望和奇迹，也引发恐惧和伦理冲突 现代分子：免除了监狱死囚区无辜者死刑，辨别“911”遇难者遗骸 从代码到商品：转基因 DNA 强大、神秘、恐怖，但非常美 双螺旋问世无人喝彩 那年，人们目光注意斯大林去世、伊丽莎白二世加冕、征服珠穆朗玛峰上 英国化学家Franklin功不可抹：拍摄极为精确的X光片。男性统治科学界，37岁英年早逝 DNA结构的多态性 B构象：常见，生理盐溶液中，92%相对湿度 A构象：钠、钾、铯，75%，DNA-RNA C构象：铯，66% D、E构象 DNA supercoiling Closed-circular DNA: linking number(Lk) Supercoiling Topoisomer Twist and writhe Intercalators : EB Energy of supercoiling topoisomerases DNA Triplex 精确切割靶序列—分子剪刀，制作染色体图谱、基因分离、DNA测序 基因表达抑制物 阻止序列专一性蛋白质的结合 DNA Tetraplex 存在：真核生物染色体末端的端粒中 端粒DNA的序列在染色体末端的维持及复制中起重要作用，它们在染色体组装、减数分裂、有丝分裂中起中介作用，并使染色体的结构得以稳定。 Nucleic acid structure Highly charged polymers with a negative charge on each phosphate The sequence is conventionally written from the free 5’-to the free 3’-end of the molecule 1bp核苷酸，分子量平均660Da 1um长DNA双螺旋相当于3000bp或2 000 000 Da Chemical and physical properties of nucleic acids Stability Effect of acid: the basis of chemical DNA sequencing Effect of alkali Chemical denaturation:urea,formamide Viscosity:neither shearing nor sonication denatures the DNA,they merely reduce the length of the double-stranded molecules in the solution Buoyant density:exact density of DNA is a function of its G+C content Spectroscopic and thermal properties UV absorption: 260 nm Hypochromicity Quantitation of nucleic acids: at a concentration of 1mg /ml and 1 cm pathlength,double-stranded DNA has A260=20. RNA and single-stranded DNA have A260=25 Purity of DNA:A260/A280 ratio value is 1.8. Above 1.8 suggest RNA contamination and below 1.8 suggest protein contamination Thermal denaturation:Tm renaturation DNA复制 半保留复制（原核、真核） 细菌、病毒、线粒体：单复制子 真核：多个复制子 双向等速复制 转录 DNA不能作为模板：99%在核，1%在胞浆的线粒体中，而蛋白质合成在细胞质中。 DNA转录的RNA大多无活性，需加工 四类RNA：mRNA、tRNA、rRNA、snRNA（