安徽师大 分子生物学Chapter 3 学生.doc

Chapter 3 The Transfer of Genetic Information— From DNA to RNA 教学目的： 本章要求学生掌握中心法则及其进展、原核生物的RNA聚合酶和启动子及其结构、真核生物的RNA聚合酶和启动子及其结构、真核基因转录产物的修饰和剪切等。 重点与难点： 1、原核生物和真核生物的 2、启动子3、RNA的加工 主要教学内容： Transcription Overview 1. Gene Expression Processes (1) Gene Expression (2) Steps 2. Coding Strand Antisense Strand (Coding Strand: also called non-template strand, plus strand, sense strand; (Antisense Strand: also called template strand, minus strand, anti-sense strand. 3. Steps are required for the transcription (1) Template recognition (2) Initiation (3) Elongation (4) Termination l??? 模板识别开始于RNA结合到双链DNA的启动子上时，然后DNA双链被解开，露出模板。从RNA聚合酶结合点开始通过局部解链形成转录泡。 2? 起始指RNA中第一个核苷酸键的合成。酶合成最初约9个核苷酸键时一直停留在启动子上。（当合成键9时，为无效合成，起始阶段被延长。无效合成部分会被释放，重新合成）当酶成功的合成9个键并离开启动子前移时，起始阶段停止。为RNA聚合酶结合到模板上并完成初始阶段转录所提供的DNA序列称为启动子。 3? 伸长阶段中，RNA聚合酶沿模板前移异使RNA链增长。酶前移时，安解开一段DNA链使模板暴露出来。核苷酸共价结合到增长的RNA链的3ˊ端，在解链区形成DNA-RNA杂交体。解链区后面，DNA模板链与原互补链重新回复双螺旋状态。RNA成为自由单链，伸长过程引起破坏DNA结构的转录泡的移动，移动中暂时解链区的模板键与分生的RNA在生长点处配时。 4??结束过程包括结束位点的识别，为了结束转录，就必须停止形成磷酸二酯键，转录复合均必须分开，当最后一个碱基加到RNA链上时，RNA-DNA复合物被破坏的同时，转录泡也被破坏，DNA重新形成双螺旋，酶和RNA均被释放。引起发生这些反在的DNA序列叫做结束子。 RNA聚合酶最初的定义只是因为它能使核苷酸沿DNA模板的顺序加入RNA链中，现在它则被看做转录中包括的复杂装置的一部分。催化RNA的合成只是RNA聚合链酶作用的最小的部分。它指导核糖核苷酸与DNA的配对并催化磷酸二酯键的合成。 3.2 Main Component of Transcription (1) RNA Pol in Prokaryotes - E.coli ★ α1 α2 - required for DNA binding and assembly. ★ β β′- needed for DNA binding and catalysis. ★ ω - stabilises β′ binding. ★ σ - forms holoenzyme. （αββ′σ）全酶可以被分为两部分，核心（αββ′）酶和σ因子，名字反映了这样一个事实：只有全酶才能起始转录（启动子的选择和转录起始）。当RNA链达到8-9个碱基时，σ因子被释放，核心酶进行伸长过程，核心酶存在DNA模板上合成RNA的能力，但不能够起始转录。 (-subunit： 组装核心酶；识别启动子，广普性的，不紧密结合（相似结合）（决定哪些基因被转录） β-subunit： 结合新生RNA链和底物NTP（催化） β′-subunit: 结合模板DNA（开链） sigma (s) factor： 特异性识别启动子序列，不同启动子需不同的×××，紧密结合（辨认起始点） ω-subunit: 双链解螺旋 原核生物RNA合成能被两种抗生素抑制： β-subunit may contain two domains responsible for transcription initiation and elongation Rifampicin (利福平)： has been shown to bind to the β subunit, and inhibit transcription initiation by prokaryotic RNA po